胃癌患者外周血cd4+ cd25+ 调适性t 细胞的变化.pdfVIP

维普资讯 塞 医堂 声 2007年第23卷第l7期 2675 胃癌患者外周血 CD4+CD25+调节性 T细胞的变化 张育超 王惠英 罗招凡 摘 要 目的：探讨 胃癌 患者外周血 CD4~CD25+调节性 T细胞 的变化及 临床意义。方法 ：应用流式细胞仪检 测 52例 胃癌 患者 (胃癌组)和 24例健康对 照者 (健康组)的 CD4+CD25+调节性 T细胞水平 。结果 ：胃癌组外周血 CD4CD25调节性 T细胞较健康组 明显升高，胃癌Ⅲ+Ⅳ期患者外周血 CD4CD25+调节性 T细胞水平 比 I+Ⅱ患者 明显升高。结论 ：胃癌患者外周血 CD4+CD25调节性 T细胞水平 明显升高 ，可能是机体免疫功能受抑制的重要机 制 ，并可成为 胃癌患者机体免疫状态临床监测的指标 关键词 胃肿瘤 调 节性 T细胞 流式细胞仪 近年研究发现 CD4CD25 调节性 T细胞具有维 计算机上分析，采用 t检验 ，P0．05表示差异有统计 持肿瘤患者免疫耐受作用，在抗肿瘤治疗 中具有十分 学意义。 重要 的意义。本研究通过检测 胃癌患者外周血 CD4+ 2 结果 CD25调节性 T细胞变化 ，评价 胃癌患者的细胞免疫 胃癌组外周血 CD4CD25+调节性 T细胞水平 功能状态及其临床意义。 (15．54±5．51)％，明显高于健康组 (8．634-5．25)％(P 1 对象与方法 0．05)。胃癌组外周血 CD4CD25调节性 T细胞 比例 1．1 研究对象 胃癌患者 (胃癌组)52例 ，均经术前 与患者年龄 、性别 、肿瘤分化之 间无 明显联系 ，而 胃镜证实 ，男 38例，女 14例，年龄 29～76岁 。中位年龄 Ⅲ+Ⅳ期 患者术前外周血 CD4+CD25+调节性 T细 42岁。高分化腺癌 16例 ，中分化腺癌 14例，低分化腺 胞水平 比 I+Ⅱ患者 明显升高 ，差异有统计学意义。 癌22例。 胃癌的分期采用 TNM分期，其中 I期 8例， 见表 1。 Ⅱ期 12例 ，Ⅲ期 22例 ，Ⅳ期 10例 。健康对照者 (健康 组)24例，男 20例，女4例，中位年龄40岁 。所有对象 表 1 CD4CD25调节性 T细胞水平与 胃癌生物学特征关系 人院时检测 CD4CD25调节性 T细胞水平 。 1．2 检测方法 取静脉血 2mL。肝素抗凝 ，梯度离心 分离淋 巴细胞 ，以不完全 1640培养基洗涤 2次 。再 以 含 1％胎牛血清的完全 1460培养基重悬细胞 ．计数淋 巴细胞 ．稀释细胞浓度至 1x106／mL，取 1mL细胞悬 液置于试管中，放人冰箱备用。取上述细胞悬液 ，1 500r／min离心 10min。弃上清后 。取 FITC标记 的 CD4抗体和PE标记的CD25抗体各 20 ¨L。各管加 入单抗后置 4℃冰箱 中避光孵育 30min。后加入 1％ BSA．PBS液离心和洗涤 2次 ，稀释至 300 L移人试 管中。待作流式分析。用 BectonDikisonFACSCalibur 3 讨论 流式细胞仪测定淋 巴细胞表面各种 荧光素的荧光强 CD4CD25调节性 T细胞在维持 自身免疫耐受 中 度 ．用空 白对照和阴性对照消除 自发荧光和非特异荧 起重要作用 。亦被称为调节性 T细胞 ．1995年 由 光 (Gate圈出拟测定的淋 巴细胞群 ，每次分析 10000 Sakaguchi等[1】首次报道 。目前认为 ，CD4+CD25+调节性 个细胞)。荧光强度以二维 dot．plot散点图储存于电子 T细胞来源 于胸腺 。也可 由成熟 CD4+CD25一调节性 T 计算机中。自动分析结合某一单抗 的阳性细胞个数和 细胞在外周淋巴组织中接触特异性抗原 ，或在免疫抑 百分 比。在 FITC．CD4