泡状棘球蚴和细粒棘球蚴理化分析的实验研究.pdfVIP

摘 要 目的: 探讨细粒棘球绦虫原头节和泡状棘球绦虫原头节体外培养的理化性质变化规律。 方法: 1.细粒棘球蚴原头节的采集：从感染囊型包虫病的羊肝脏病灶中提取新鲜的细粒棘球蚴原头节， 处理后伊红染色，显微镜下观察原头蚴的活性并进行计数。活力达98%以上的方可进行下一步的培 养及测定。 2.细粒棘球蚴原头节的分组：将计数后的细粒棘球蚴原头节按照密度分为4组，分别加入装有 15ml培养基的培养瓶中，此培养液和泡球蚴培养液为同一批所配制。密度分别为空白组0(个)/15ml， 对照组10000(个)/15ml、20000(个)/15ml、30000(个)/15ml。细粒棘球蚴原头节和泡状棘球蚴原头节共 用同一空白组。 3.泡状棘球蚴原头节的采集：取饲养半年以上的种鼠进行腹腔解剖，从中获取泡球蚴原头节， 处理后伊红染色，于显微镜下观察原头蚴的活性并进行计数。活力达98%以上的方可进行下一步的 培养和测定。 4.泡状棘球蚴原头节的分组：将计数后的泡球蚴原头节按照密度分为4组，依次加入装有15ml培 养基的培养瓶中。密度分别为空白组0(个)/15ml，对照组10000(个)/15ml、20000(个)/15ml、 30000(个)/15ml。 5.测量的方式和时间节点的选择：为保证不改变培养液的理化指标，整个培养测定过程不允许 换液。在保证不改变原头节培养密度的前提下，使用移液器对培养液进行吹打，吹打均匀后迅速吸 取头节混悬液以供下一步的测量。头节分装后进行首次测量，培养1天、2天、3天、4天、5天后进行 后续测量。 6.PH、乳酸含量、钙离子含量、葡萄糖的测定：吸取培养液的上清液，转移至干燥的无菌EP管 中。应用医疗血气分析仪测量上述指标的数值。 7.原头节体内糖原含量的测定：弃去培养液的上清液后，应用糖原试剂检测盒测量原头节体内 糖原含量的变化。 结果： 1.两种原头节体外培养时上清液PH 值均呈下降趋势，且密度越大，下降趋势越明显。 2.两种原头节上清液乳酸含量、钙离子含量均呈上升趋势，且密度越大，上升趋势越明显。 3.两种原头节上清液葡萄糖含量均呈下降趋势，且密度越大，下降趋势越明显。 4.两种原头节体内糖原含量均随着原头节的生长而逐渐累积，但后期均呈下降趋势，且密度越 大，下降趋势越明显。 5.经过统计学分析发现，上述指标的变化在两种原头节组内之间比较时差异有统计学意义 （P ＜0.05），组间比较时差异无统计学意义(P ＞0.05)。 结论： I 1.泡状棘球蚴原头节和细粒棘球蚴原头节体外培养时，理化性质的变化规律相似。 2.两种原头节代谢过程中均产生以乳酸为代表的酸性物质，并导致外环境PH 下降。 3.两种原头节生长过程中均会出现钙离子累积。 4.两种原头节生长时均以外周葡萄糖为主要营养物质，摄取葡萄糖后头节将其合成糖原以供生 长发育所需。 关键词：理化性质；原头节；体外培养 II Abstract Objective To explore the physical and chemical properties of Echinococcus multilocularis protoscoleces and Echinococcusgranulosusprotoscolecesin vitro. Methods 1.The collection of Echinococcus granulosus protoscoleces: Fresh Echinococcus granulosus protoscoleces were extracted from liver lesions of sheep infected with cystic echinococcosis. After treatment with eosin staining, the activity of protoscoleces was observed. Then the number