GB/T 5413.27-1997婴幼儿配方食品和乳粉　DHA、EPA的测定.pdf

GB/r5413.27-1997 前 言 在婴幼儿配方食品中添加DHA,EPA是近两年的科技成果，对其含量的检测方法尚在探索阶段。 本标准给出的方法是在参考了大量国内外文献的基础上，经反复实验、验证而确定的，具有操作简便、快 速、灵敏度高的特点。 本系列标准从实施之日起，代替GB5413-55, 本标准由中国轻工总会提出。 本标准由全国乳品标准化中心归口。 本标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。 本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公 司、雀巢(中国)投资服务有限公司。 本标准主要起草人:刘波、杨金宝、王芸。 中华人民共和国国家标准 婴幼儿配方食 品和乳粉 GB/T5413.27-1997 DHA、EPA 的测定 代替GB5413-85 Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren -DeterminationofDHAandEPAcontents ， 范围 本标准规定了用气相色谱法测定DHA和EPA的方法。 本标准适用于婴幼儿配方食品和乳粉中DHA和EPA含量的测定。 2 方法提要 抽提出样品内的脂肪，经甲基化反应后，以气相色谱 火焰离子化检侧器定量测定样品中的DHA 和EPA的含量。 3 试剂 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 3.1高峰氏淀粉酶(Taka-Diastase). 3.2A水:体积分数25%0 3.3 乙醇:体积分数_95%o 34 乙醚。 3.5石油醚:沸程，30-60C。 3.6 正己烷:色谱纯。 3.7 氢氧化钾的甲醇溶液:c(KOH)为4mol/L，使用无水甲醇。 3.8 标准溶液 3.8.1标准贮备液:准确称取1.Oog标准鱼油(EPA163.9mg/g,DHA135.30mg/g)，用正己烷溶解并 定容至5OmL(EPA的浓度为3.2678mg/mlDHA的浓度为2.7060mg/mL)，冷冻保存。 3.8.2 标准工作液:取标准贮备液 1.OOmL，用正己烷烯释并定容至 IOmL(EPA的浓度为 0.3268mg/mL,DHA的浓度为。.2706mg/mL)，使用前配制，以防止溶剂挥发而使浓度改变。 4 仪器和玻玻器皿 常用实验室仪器及: 4门 毛氏抽脂瓶。 4.2 离心机。 4.3 水浴锅。 4.4 振摇器。 45气相色谱仪。 国家技术监督局1997一05一28批准 1998一09一01实施 Gs/T5413.27-1997 4.6 火焰离子化检测器。 4.7 色1爵柱:2m,10%EGSS,GAS-CHROMQM/100^-200目，不锈钢柱。 5 操作步骏 5门 ff}W,处理 5.1.1 含淀粉样品 准确称取1.000og样品放人毛氏抽脂瓶中，加入。.1gTaka淀粉酶，再加入lOmL45-50C的蒸馏 水，混合均匀后，用氮气排除瓶中空气，盖上瓶塞，置45C烘箱内30min，取出冷却室温。 5.1.2 不含淀粉样品 准确称取样品1.000og.放入毛氏抽脂瓶(4.1)中，用lOmL65℃的热水溶解，振摇，使样品完全分 散，水冷至室温。 5.2 测定液的制备 5.2.1于上述样品溶液中加入2mI体积分数为25%的氨水((3.2),置于 “℃水浴((3-3)中15min，取 出，轻摇，冷至室温。 5.2.2 加入10mL乙醇(3.3),混匀。加入25mL乙醚(3.4)，塞上塞子振摇lmin。加入25mL石油醚 (3.5),塞上塞子振摇lmin。再加入25mL石油醚，塞上塞子振摇lmin。离心或静止，使醚层、水层分开 有机层转入烧瓶中。第二次提取加入的试剂为5mL乙醇,15ml乙醚,15mL石油醚，操作同前。第三次 提取不加乙醉，只用15mL乙醚和15mL石油醚，如上操作。 5.2.3 把提取的醚液合并，减