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消毒、灭菌的方法 热力灭菌法 辐射杀菌法 滤过除菌法 干燥和低温抑菌法等 化学方法 物理学方法 二、物理消毒灭菌法 (一)热力灭菌法 高温对细菌具有明显的致死作用,因此最常用于消毒和灭菌。 分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。 1.干热灭菌法 (1) 焚烧 用于废弃物品或动物尸体等 (2)烧灼 用于微生物学实验室的接种环、试管口等的灭菌。 无菌区 10-20cm (3) 干烤 利用干烤箱灭菌 (160~170oC,2h) 适用于高温下 不变质、不损坏、 不蒸发的物品。 160℃ 2h (4) 红外线照射 红外线的杀菌作用是利用其产生的热能杀灭微生物,与干热相似。 这种热能不经空气传导,以辐射方式向外传播故无明火、不怕风。但红外线光源越强、光源距消毒物品越近,温度越高,其热效应只能在照射到的表面产生,不能使一个物体的前后左右均匀加热。 2. 湿热灭菌法 最常用,效果优于干热灭菌法。 理由: ①湿热中细菌菌体蛋白质较易凝固变性 ②湿热的穿透力比干热大 ③湿热的蒸气有潜热效应存在 (1)巴氏消毒法 用较低温度杀灭液体中的少数病原菌(结核杆菌)或特定微生物(乳酸杆菌)、保持物品中所需不耐热成分不被破坏的消毒方法。 用于消毒牛乳、酒类(61.1~62.8oC,30min或71.7oC,15~30s)。 (2) 煮沸法 100oC,5min 杀死细菌繁殖体。 100oC,1~2h 杀灭细菌芽胞。 加入2%碳酸钠,沸点为105℃,可促进杀灭细菌芽胞、防金属物品生锈。 2%碳酸钠 (3) 流动蒸气消毒法 利用1个大气压下100oC的水蒸气进行消毒 细菌繁殖体15~30min可被杀灭 (4) 间歇蒸气灭菌法 利用反复多次的流动热蒸气间歇加热以达到灭菌的目的 100oC,15~30min,37oC孵箱过夜×3次。 适用于一些不耐热的含糖、牛奶等培养基。 (5) 高压蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌器是一个密闭、耐高压蒸锅。 103.4kPa(1.05kg/cm2)——温度可达121.3oC,15~20min,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。 (二)辐射杀菌法 1. 紫外线 波长240~300nm的紫外线具有杀菌作用,其中以260~266nm最强。 原理:主要作用于DNA,一条链上相邻的两个嘧啶形成二聚体,干扰DNA的复制与转录,导致细菌的变异或死亡。 特点:紫外线穿透力较弱;对人体皮肤、眼睛有损伤作用。 用途:一般只用于手术室等的空气消毒,或用于不耐热物品的表面消毒。 2. 电离辐射(包括高速电子、χ射线和γ射线) 具有较高的能量和穿透力,对微生物有致死作用。 常用于一次性医用塑料制品的消毒;亦可用于食品、药品和生物制品的消毒或灭菌。 滤膜 (三) 滤过除菌法 用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌,达到无菌的目的。 主要用于一些不耐高温灭菌的血清、抗生素以及空气等的除菌。 (四)干燥与低温抑菌法 作用:干燥法常用于保存食物,浓盐或糖渍食品可使细菌脱水,造成生理干燥,使细菌生命活动停止。 低温可使细菌新陈代谢减慢,故常用于保存细菌菌种。 三、化学消毒灭菌法 定义:是用化学药品进行消毒的方法 作用机制 ①使菌体蛋白质变性或凝固 ②破坏细菌的酶系统 ③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通透性,导致细菌死亡。 化学消毒剂的使用方法: 浸泡法(immersion) 擦拭法(rubbing) 喷雾法(nebulization) 熏蒸法(fumigation) 脱水剂脂溶剂蛋白质变性剂 乙醇 70~75%效果最好 皮肤、器皿擦拭或浸泡。 浓度 高浓度效果差 无水的无杀菌作用 常用的化学消毒剂 过氧化氢 无色液体,属环保型消毒剂。3%皮肤、伤口消毒
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