血压的肾脏调节：mir-29参与高血压肾损伤的机制及renalase与esrd患者自主神经活性的关系-renal regulation of blood pressure mir - 29 participates in the mechanism of renal injury in hypertension and the relationship between renal ase and autonomic nerve activi.docx

血压的肾脏调节：miR-29 参与高血压肾损伤的机制及Renalase 与 ESRD 患者自主神经活性的关系 中文摘要第一部分TNFα 及其受体在 SS 及 SS-13BN 大鼠肾髓质的表达目的：检测并比较 TNFα 及其受体 TNFRSF1A 在 SS 及 SS-13BN 大鼠肾髓质的表 达。方法：1 将 SS 及 SS-13BN 大鼠（n=9）分为 4 组：SS 低盐饮食（0.4%）组、SS 高盐饮食（4%）组、SS-13BN 低盐饮食（0.4%）组、SS-13BN 高盐饮食（4%）组。所 有大鼠以低盐饮食喂养至 7 周龄，处死低盐组大鼠并分离肾髓质组织。换高盐饮食喂养高盐组大鼠至 8 周龄，处死大鼠并分离肾髓质组织。 2 将 SS 大鼠（n=6）分为 3 组：低盐饮食（0.4%）组、高盐（4%）3 天组、高盐（4%）7 天组。所有大鼠以低 盐饮食喂养至 6 周龄，处死低盐组大鼠。换高盐饮食，并于高盐 3 天、7 天分别处死 高盐组大鼠并分离肾髓质组织。利用实时定量 PCR 技术检测各组肾髓质 TNFα 及其 受体 TNFRSF1A 的表达。结果：SS 大鼠高盐 7 天后肾脏外髓部的 TNFα 水平显著高 于低盐组，且这种变化不存在于 SS-13BN 大鼠中。SS 大鼠高盐 3 天组肾髓质 TNFα 较低盐组无显著变化；且 SS 大鼠高盐 7 天组的肾髓质 TNFα 水平显著高于高盐 3 天 组及低盐组；TNFRSF1A 在各组变化均无显著差异。结论：肾髓质的 TNFα 表达水 平在 SS 大鼠高盐饮食 3-7 天内迅速上升，并显著高于低盐组。TNFα 可能在 SS 大鼠 血压调节及肾脏损伤过程中起重要作用关键词：SS 大鼠；SS-13BN 大鼠；TNFα；TNFRSF1A。第二部分TNFα 对 mTAL 细胞 miR-29 家族及纤维化相关基因的影响目的： 探讨 TNFα 对 mTAL 细胞 miR-29 家族及纤维化相关基因的影响。方法： 培养 mTAL 细胞并以 TNFα 刺激 24h、48h，检测各组细胞中 miR-29 及纤维化相关基 因的表达；培养 mTAL 细胞，过表达 miR-29 并以 TNFα 刺激 24h，检测各组细胞中 纤维化相关基因的表达；培养 mTAL 细胞，转染 NFkB p65 siRNA 并以 TNFα 刺激 24h，I中文摘要血压的肾脏调节：miR-29 参与高血压肾损伤的机制及 Renalase 与 ESRD 患者自主神经活性的关系检测各组细胞中 miR-29 及纤维化相关基因的表达。 结果：TNFα 刺激 mTAL 细胞24 小时或 48 小时，能显著下调 miR-29 家族基因的表达，且上调纤维化相关基因 Acta2、Col4a1、Col4a2 的水平；过表达 miR-29a 能显著下调 Acta2、Fn1、Col4a1、 Col4a2 的基因表达；过表达的 miR-29c 能显著下调 Col4a1、Col4a2 的基因表达，且 miR-29c 显著减轻了 TNFα 诱导的 Col4a1、Col4a2 的上调；NFkB p65 siRNA 转染显 著上调 miR-29、下调 Col4a1、Col4a2，且逆转由 TNFα 下调的 miR-29 的表达。 结 论：TNFα 可能通过 NF-κB 途径下调 miR-29 的表达； NF-κB 途径的抑制可能对肾脏 纤维化起保护作用；Acta2、Fn1 可能是 miR-29a 的潜在靶基因；miR-29c 对 TNFα 诱 导的纤维化有保护作用。关键词：mTAL；TNFα；miR29；p65 siRNA。第三部分TNFα 抑制剂依那西普肾内注射对 SS 大鼠血压、miR-29 及肾损伤的影响目的：探讨 TNFα 抑制剂依那西普肾内注射对 SS 大鼠血压、miR-29 及肾损伤的 影响。方法：将 SS 大鼠分为依那西普组和生理盐水对照组（n=6）。以低盐饮食（0.4%） 喂养至 6 周龄，行右肾切除术。继续喂养至 7 周龄，行股动脉置管测压术及肾内导管植入术。术后 7 天开始测量血压。记录基础血压 3 天后开始肾内注射依那西普，并于依那西普处理后 3 天换高盐饮食（4%）继续喂养 2 周。处死大鼠并收集组织，分析 各组大鼠血压、miR-29 及肾损伤的变化。结果：肾内注射依那西普能显著降低 SS 大 鼠血压；依那西普处理组呈现出蛋白管型、肾髓质纤维化减轻的趋势；肾脏内髓的 miR-29 家族在依那西普组呈现上升趋势，且纤维化相关基因呈现下调趋势。结论： 肾内 TNFα 在 SS 大鼠血压调节过程中起重要作用；依那西普可能通过降低血压、上 调 miR-29 表达从而减轻肾脏纤维化。关键词：SS 大鼠；血压；依那西普。第四部分Renalase