cox2 shrna对大鼠肝星状apoa1 apoe ldlr表达的影响word格式论文.docxVIP

英文缩写ODPBSPCR PTGS RNAi RTshRNA shRNA1shRNA2shRNA3R NAi siRNA主要缩写语英文索引英文全称Optical densityphosphate-buffered salinePolymerase chain reaction Post-transcriptional genesilence RNAinterferenceReversetranscription Short hairpin RNAShort hairpin RNA1Short hairpinRNA2Short hairpin RNA3RNA interferenceSmall interferingRNA中文全称光密度磷酸盐缓冲液聚合酶链反应转录后基因沉默RNA干扰逆转录短发夹状RNA短发夹状RNA1短发夹状RNA2短发夹状RNA3RNA干扰小干扰RNACOX-2shRNA对大鼠HSCapoA1、apoE、LDL-R表达的影响中文摘要目的研究COX-2 shRNA 对大鼠HSCapoA1、apoE、LDL-R 表达的影响。方法采用带不同COX-2shRNA 片段的荧光质粒，通过脂质体LiplofectamineTM 2000转染大鼠HSC，荧光显微镜下评估细胞的质粒转染率。实验分为五组：即COX-2shRNA1 转染组、COX-2shRNA2 转染组、COX-2shRNA3 转染组、空载体转染组、空白对照组。利用RT-PCR技术检测各组在24h、48h和72h后对apoA1、apoE、LDL-RmRNA表达的影响；同时应用免疫细胞化学法检测各组在48h、72h 后apoA1、apoE、LDL-R 的蛋白表达变化。结果HSC可以表达apoA1、apoE、LDL-R，其中LDL-R 主要分布于HSC的细胞膜，其余均分布于胞浆中。RT-PCR结果显示:COX-2shRNA1 、COX-2shRNA2、COX-2shRNA3 均能沉默大鼠HSCapoA1、apoE mRNA的表达，增强LDL-R mRNA 的表达，以COX-2shRNA1 组的各时间点及各片段组72h 后的作用更明显。3. 通过免疫细胞化学法检测示: COX-2shRNA1-3 三条序列均能沉默大鼠HSCapoA1、apoE 的蛋白表达，增强LDL-R的蛋白表达，COX-2shRNA1 组的各时间点及各片段组72h 后的作用更明显。结论不同片段的COX-2shRNA均可下调活化HSC apoA1、apoE及增强其LDL-R 的基因和蛋白表达。有干预HSC脂质代谢的作用，使HSC由去脂向储脂转变的趋势。COX-2shRNA1 对大鼠HSCapoA1、apoE、LDL-R mRNA和蛋白的表达调控作用较明显。关键词：环氧合酶-2；shRNA：HSC；载脂蛋白；低密度脂蛋白受体；EffectsofCOX-2shRNAonexpressionofapoA1,apoE,LDL-RinHSC-T6AbstractObjectiveToresearchtheexpressionofCOX-2,apoA1、apoE、LDL-RinHSCby COX-2shRNAin rat .MethodsTheplasmidofCOX-2shRNAwithdifferentfragmentswastransfectedrat`s HSCbyliposomeLiplofectamineTM2000，toassesscelltransfectionefficiencyof plasmid under thefluorescencemicroscope.ItWeredividedintofivegroups:COX-2shRNA1transfectedgroup, COX-2shRNA2transfectedgroup,COX-2shRNA3transfectedgroup,emptyvector transfectiongroupandblankcontrolgroup.TheexpressioninfluenceofapoA1,apoE, LDL-RmRNAisexaminatedbytheRT-PCRtechnicalat24h,48hand72hinrat′s HSC.TheproteinexpressionofapoA1,apoE,LDL-Risexaminatedby immunocytochemistryat24h, 48h and 72h in rat′sHSC.ResultsThemRNAandproteinofapoA1,apoE,LDL-RisexpressedintheHSC,LDL-R proteinmainlydistributedintheHSCcel