asic2参与胞外酸化诱导树突状细胞il1β分泌word格式论文.docxVIP

英文缩略词表APCAntigen-presentingcell抗原提呈细胞ATPAdenosinetriphosphate三磷酸腺苷ASICsAcid-sensingion channels酸敏感离子通道BMDCsBonemarrow-derived dendritic cells骨髓来源的树突状细胞BCABicinchoninicAcid二辛可酸DAMPdanger-associated molecularpattern损伤相关分子模式ECLEnhanced Chemical luminescence增强化学发光法ENac/DEGEpithelial sodium channel/Degenerins退化上皮钠通道蛋白FBSFetalBovine Serun胎牛血清FAMCarboxyfluorescein羧基荧光基团FITCFluorescein isothiocyanate异硫氰酸荧光素FLICAFluorescent labeled inhibitor绿色荧光基团ofCAspasesGM-CSFGranulocyte macrophage-单核-粒细胞集落刺激因子colonystimulatingfactorHRPHorseradish peroxidase辣根过氧化物酶IL-4 IL-1βLPSInterleukin-4 Interleukin-1βlipopolysaccharide白细胞介素4白介素1β细菌脂多糖kDakilodalton千道尔顿mlMillilitre毫升MFIMean fluorescenceintensity平均荧光强度NLRP3pgNOD-likereceptor protein 3picogramNOD样受体蛋白3皮克PIProdium iodide碘化丙啶pHPotential ofhydrogen酸碱度PAGEPolyacrylamidegel electrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳PVDFPolyvinylidene fluoride聚偏二氟乙烯PBSPhosphate buffered saline磷酸盐缓冲液SDSSodium dodecyl sulfate十二烷基磺酸钠siRNA TBST TEMEDTNF-αSmall interferenceRNA TBS withTween 20N,N,N,N-TetramethylethylenediamineTumor necrosis factor-α小干扰RNA含Tween 20 的Tris 缓冲盐N,N,N,N-四甲基二乙胺肿瘤坏死因子αASIC2参与胞外酸化诱导的树突状细胞IL-1β的分泌硕士研究生：明冰霞导师：谭政讲师郑芳教授龚非力教授华中科技大学同济医学院免疫学系摘要目的：IL-1β是一种重要的炎性细胞因子，树突状细胞（DC）是其重要来源。酸敏感离子通道（ASICs）是DC感知酸化刺激的受体，细胞外微环境酸化是一种引起细胞应激的常见危险信号。本实验主要研究细胞外酸化对BMDCs 分泌IL-1β 的影响以及ASICs介导其分泌的分子机制。方法：诱导培养骨髓来源的树突状细胞BMDCs，成熟后用LPS（100ng/ml）预处理细胞12h，进行分组刺激。胞外酸化以pH6.5的培养基模拟，刺激4h后收上清，ELISA 检测IL-1β 的分泌；刺激后收细胞通过流式细胞术和WB检测胞内caspase-1 的活化情况，以及阻断其活化后检测IL-1β 的分泌；运用干扰RNA（siRNA）降低ASIC2的表达后，检测酸刺激对DC 分泌IL-1β 的影响。结果：1）胞外酸刺激可以诱导BMDCs 分泌有活性的IL-1β。2）酸刺激组与未刺激组相比，活化的caspase-1 明显升高。3）siRNA干扰ASIC2 后，酸刺激分泌IL-1β 明显减少。结论：胞外酸化可诱导ASIC2酸敏感离子通道的活化，介导胞内caspase-1活化进而促进BMDCs 分泌促炎因子IL-1β。关键词：酸化;炎症小体;树突状细胞;白介素1β;酸敏感离子通道ASIC2isinvolvedinacidosis-inducedsecretionofIL-1βMaster Candidate:Bingxia MingMentor: ZhengTanProf. FangZhengProf.Feili Gong Department ofImmunologyTongji Medical Collegeof HuazhongUniversityof ScienceandTechnologyAbstractObjective：Interleukin1β(IL-1β)isanimportantproinflammatorycytokine.The primarysources