猪细小病毒结构蛋白VP2的研究进展.pdfVIP

第十三次学术研讨会会议论文集 过程，将细胞毒样品的PCR检测试验缩短到4小时内完成。 赵丽，催保安等根据猪伪狂犬病毒gH，gE基因的序列，设计了两对引物及其对应的taqM孤探针， 通过对引物，探针和样品DNA提取方法等进行优化，建立了鉴别PRV野毒与疫苗感染的荧光定量 PCR方法。用此方法对60份疑似组织样品进行检测，并与血清中和试验，常规PCR相比较，结果 显示该方法具有快速，灵敏，特异性，重复性好和能对样品进行定量检测等优点。此方法的建立， 为猪伪狂犬病病毒的早期诊断和定量分析猪伪狂犬病病毒感染程度奠定了基础。 PCR技术诊断PRv具有敏感性高、特异性强、快速、简便等特点，然而试验需一定设备和对病 料进行特殊处理，一般实验室水平有限，难以掌握，随着PCR研究的深化，该技术不断的完善和发展，将 更趋简便、快速、实用。 4．3基因芯片技术 高淑霞等应用PCR分别扩增猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒，猪伪狂犬病毒，猪细小病毒，猪圆 Vector构建重组 环病毒，日本乙型脑炎病毒和猪瘟病毒的一段保守序列，克隆到pMDl8—TSimple 质粒，用于制备各种病毒探针。将各探针按一定的阵列点加到硝酸纤维素膜上并加以固定，制备成 低密度检测基因芯片。在多重PCR扩增过程中用生物素标记的dUTP对待测样品进行标记，扩增产 物与芯片杂交用扫描仪对杂交结果进行扫描分析。经过对68份样品检测的结果证明，该方法可以同 时检测待测样品中上述6种病毒核酸的存在情况，与PCR方法相比，显示了较高的灵敏度，该方法 的建立，为大批量快速诊断，普查猪病毒性繁殖障碍疫病提供了保证。 5小结 近年来，伪狂犬病对养猪业的危害日益严重，全世界每年因其受损高达数十亿美元，因此伪狂犬病 越来越受到人们的重视。伪狂犬病在欧美和日本等国已被列为重点防治猪病之一，大部分欧盟国家和 美国等都已相继启动了伪狂犬病扑灭计划，采用基因缺失苗和特异性鉴别诊断相结合的方法，效果十 分明显。由于伪狂犬病病毒宿主种类多样，且存在程度不同的潜在 感染，各种毒株之间也存在基因重组，所以其致病机理、各种糖蛋白在PRV与宿主细胞之间相互作用 的分子机制、新型诊断方法的建立和新型疫苗的研制仍需进一步研究和探讨。 参考文献(略) 猪细小病毒结构蛋白VP2的研究进展 甄洪花’沈志强2※单虎1王金良2 (1青岛农业大学动物科技学院，山东青岛266109；2山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州256600) 摘要猪细小病毒是引起猪的繁殖障碍性疾病的重要病原之一，目前该病在世界各个国家均有流行和报道，给养 猪业带来巨大损失，传统的灭活苗和弱毒苗又都存在各自的缺陷，新型诊断试剂及疫苗的研究迫在眉睫。VP2蛋白是 病毒粒子的主要衣壳蛋白，其在体外自我装配成类病毒粒子、刺激机体产生抗PPv中和抗体、可作为抗原转运载体等 特性，使vP2蛋白在猪细小病毒诊断试剂及新型疫苗研究领域具有很大的潜力。本文从VP2基因分子生物学、VP2蛋 白在诊断与预防等方面的研究进展进行了综述。 关犍词猪细小病毒；VP2蛋白；分子生物学；诊断与预防 猪细小病毒(PorcineparVovillls，PPV)是引起猪繁殖障碍的重要病原之一IlJ，主要引起初产母猪不 孕、流产、产死胎，木乃伊胎和弱仔，同时也能引起某些皮肤病和腹泻uj。该病最早是在1966年发 等【3】从猪流产的胎儿中分离出PPv，首次证明了它的致病作用，随后日本、荷兰、丹麦、美国、澳 大利亚等国家先后报道了该病，我国自20世纪80年代从各地相继分离到PPVh引。目前该病在世界 各个国家均有流行和报道，并常与其他病原如圆环病毒、繁殖与呼吸障碍综合征病毒等混合感染而 致病，给养猪业带来巨大损失。80年代以来，各国学者致力于加强关于PPV结构和基因组的研究， 75 综述部分 现已取得了一些进展，尤其是vP2作为其重要的结构蛋白一度成为PPv研究方面的热点，本文将对 vP2的基因分子生物学特点及其在诊断与预防等方面的研究进展作一概述。 1 PPV VP2的分子生物学研究 PPv属于细小病