胰高血糖素样肽1受体激动剂对糖尿病脑病大鼠认知功能的影响.docVIP

精品论文 参考文献 胰高血糖素样肽1受体激动剂对糖尿病脑病大鼠认知功能的影响 龙海燕 肖四海 谭华清（通讯作者） 　　（南华大学附属娄底医院 娄底市中心医院 湖南娄底 417000） 　　【摘要】目的:观察胰高血糖素样肽1受体激动剂艾塞那肽对糖尿病脑病大鼠认知功能的影响，并探讨其机制。方法:SD雄性健康大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组和艾塞那肽治疗组。用链脲佐菌素（60mg/kg）腹腔注射建立糖尿病动物模型，艾塞那肽治疗组皮下注射艾塞那肽（1nmol/kg/d）12周，其余2组给予同等体积的生理盐水。分别采用葡萄糖氧化酶法和放免法测定血糖和血胰岛素浓度；通过Morris水迷宫法评价各组大鼠学习记忆能力；采用Westernblot检测大鼠海马组织中胰岛素受体底物-1（IRS-1）的表达。结果:与对照组比较，糖尿病模型组大鼠血糖显著升高，血胰岛素水平明显著降低，找到站台所需时间明显延长，IRS-1的表达显著降低（均Plt;0.05）；与糖尿病模型组比较，艾塞那肽组血糖显著降低，而血胰岛素明显升高，找到站台所需时间明显缩短，IRS-1的表达水平显著增加（均Plt;0.05）。结论:胰高血糖素样肽1受体激动剂艾塞那肽改善了改善了糖尿病脑病大鼠的认知功能，其机制可能与艾塞那上调海马中IRS-1的表达有关。 　　【关键词】糖尿病脑病 胰高血糖素样肽1受体 艾塞那肽 　　【中图分类号】R587.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）23-0081-02 　　糖尿病是严重危害人类健康的疾病，可引起多种急慢性并发症。糖尿病对中枢神经系统的影响也越来越引起人们的重视，糖尿病损害认知功能，可作为认知功能障碍的重要独立危险因素[1]。糖尿病脑病是糖尿病慢性中枢神经系统并发症，主要表现为痴呆样的学习和记忆功能的障碍[2]。胰高血糖素样肽l（glucagon-like peptide-1, GLP-1）是一种由肠道L细胞分泌的肠促胰岛素，GLP-1是通过与受体结合，而发挥生理学作用[3]。GLP-1的受体激活后可发挥促进胰岛素分泌，抑制胰高血糖素分泌，减慢胃排空，抑制食欲，刺激胰岛beta;细胞增殖分化、抑制beta;细胞凋亡，降血脂等抗糖尿病作用。然而GLP-1的受体激活后是否对糖尿病脑病有影响还未见文献报道。因此本研究拟观察GLP-1的受体激动剂艾塞那肽对糖尿病脑病大鼠认知功能的影响，并从胰岛素受体底物-1（Insulin receptor substrates-1, IRS-1）的角度探讨其机制。 　　1 材料和方法 　　1.1材料 　　艾塞那肽购自美国礼来公司，链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）购自美国Sigma公司，血清葡萄糖和胰岛素检测试剂盒由北京中国原子能研究所提供。BCA蛋白定量试剂为Pierce公司产品，IRS-1和beta;-actin抗体以及辣根过氧化物酶标记二抗为美国Santa Cruz产品。 　　1.2实验动物 　　36只健康雄性Wistar大鼠，6-7周龄，体质量为200plusmn;20 g，由南华大学实验动物学部提供。 　　1.3实验方法 　　1.3.1实验分组和动物模型制备 　　36只Wistar大鼠适应性喂养一周后，用随机数字表法分为对照组（n=10），糖尿病造模组（n=26）。糖尿病造模组大鼠一次性腹腔注射STZ（60 mg/kg）制备糖尿病大鼠模型，STZ用无菌柠檬酸缓冲液（pH值为4.2，0.1 mmol/L）)稀释，对照组给予等量柠檬酸缓冲液腹腔注射。72 h后连续3次尾静脉采血测随机血糖，血糖值＞16.7 mmol/L为模型制备成功。期间死亡3只，1只，血糖未达到诊断标准，成模22只。成模大鼠用随机数字表法随机选取大鼠作为糖尿病模型组（n=10）和艾塞那肽治疗组（n=10），余下的两只舍弃。艾塞那肽治疗组大鼠给予艾塞那肽（1 nmol/kg/d）皮下注射。对照组和糖尿病模型组给予等量生理盐水皮下注射，共干预治疗8周。实验期间各组均无大鼠死亡。 　　1.3.2 Morris水迷宫测试 　　Morris水迷宫系统由圆形水池、站台和记录系统三部分组成，在圆形水池中分为4个象限，站台高40 cm、位于其中一个象限的中央，水深41 cm，水面高出站台1 cm，放入蓝墨水使水成蓝色，使大鼠不能看见站台。各组大鼠在处死前5 d开始进行水迷宫测试，前4 d进行训练，4个象限每天各训练1次；第5天进行测试，记录大鼠从入水到找到站台所用的时间(s)作为测试成绩。 　　1.3.3血糖、血胰岛素的测定 　　水迷宫行为学测试结束后尾静脉采血留取血标本用于测定血糖和