浅谈手工浓缩血小板的汇集滤白及深低温保存.docVIP

精品论文 参考文献 浅谈手工浓缩血小板的汇集滤白及深低温保存 梁瑞萍 　　（阳泉市中心血站 山西阳泉 045000） 　　【摘要】目的：探讨血小板输注治疗各种原因因血小板减少或功能障碍引起出血。方法：目前，临床应用的血小板主要有单采血小板和手工浓缩浓缩血小板，由于单采血小板的捐献不能满足临床需求，所以手工分离浓缩血小板已逐渐成为临床血小板供应的重要组成部分。结果；利用普通无偿献血者捐献的全血手工分离浓缩血小板，可使全血中的血小板得到充分利用。结论：本站采用血小板专用滤器以每14u为一个治疗量，制备汇集滤白混合血小板用于临床，取得了很好的临床效果 　　【关键词】浓缩血小板 深低温保存 　　【中图分类号】R457 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）12-0072-01 　　血小板输注是治疗各种原因因血小板减少或功能障碍引起出血的有效治疗手段。目前，临床应用的血小板主要有单采血小板和手工浓缩浓缩血小板，由于单采血小板的捐献不能满足临床需求，所以手工分离浓缩血小板已逐渐成为临床血小板供应的重要组成部分，利用普通无偿献血者捐献的全血手工分离浓缩血小板，可使全血中的血小板得到充分利用，避免资源浪费，还可减少悬浮红细胞保存过程中白细胞-血小板微聚物的形成，降低受血者发生血管栓塞的危险，减少非溶血性反应的发生。手工浓缩血小板多人份输注容易引起同种免疫反应而导致输注无效，其主要原因为HLA抗体引起，其次为HPA抗体，去除手工浓缩血小板中的白细胞就可减少输血反应和最大限度地避免同种免疫的发生。我站采用血小板专用滤器以每14u为一个治疗量，制备汇集滤白混合血小板用于临床，同时制备冰冻汇集滤白混合血小板，储存备用，用于急诊和手术出血患者，取得了很好的临床效果，现将方法报告如下： 　　1 材料与方法 　　1.1材料 采集于五联袋6小时内22plusmn;2℃保存的全血400ml；血小板汇集滤除白细胞输血器：南京双威生物医学科技有限公司提供；二甲基亚砜（DMSO）：广东新普公司提供。 　　1.2仪器设备 Cyrofuge6000i大容量冷冻离心机（德国）血小板保存箱；速冻冰箱；海尔 -80℃超低温冰箱；冰冻解冻箱；kjx-lA/CD-DR解冻箱（苏州医用仪器厂）血球计数仪；希斯美康XT-1800i血球计数仪(日本) 　　1.3浓缩血小板的制备：采用富浆法。 　　1.3.1第一次离心：400ml全血离心力850g、加速度9、减速度4、温度20℃-24℃、时间8分钟。 　　1.3.2全血装杯时要在杯内填塞些空袋，注意血袋不能打折，以防止离心后红细胞挂壁而造成血浆中混入红细胞超标。最佳离心效果以离心后上层血浆无肉眼可见的红细胞，血浆与红细胞分层清晰并无明显白膜层为佳。如果离心效果不理想可混匀后再次离心。使用分浆夹分离时主袋上的易折塞只开一半待血浆分出2/3后继续减慢速度，以上层血浆分干净且无红细胞混入为标准。使用成分分离机分离时速度均匀效果优于分浆夹。 　　1.3.3第二次离心：以离心力2990g、加速度9、减速度4、温度20℃-24℃、时间10分钟。2单位血小板留浆30-45ml。 　　1.3.4血小板解聚：分离好的浓缩血小板放置室温静置1小时，待血小板完全解聚后放入血小板保存箱保存。 　　1.4汇集滤白血小板的制备： 　　1.4.1挑选检验结果合格的血小板，外观无肉眼可见的红细胞，解聚完全无细小颗粒呈云雾状，每14单位为一个汇集量，容量为280-300ml, 血小板计数＞2.5times;1011。 　　1.4.2用无菌接管机将单袋浓缩血小板汇集到汇集过滤器材的空袋中，如果感觉外观发红，可用轻离心将红细胞再次去除。然后将汇集袋挂在架子上，先将滤盘倒置再打开滑轮待滤盘内充满液体后再将滤盘翻转，调节流速为点线状过滤白细胞。过滤完成后热合。如果临床需要新鲜血小板即可发往临床，如需保存可按照下面的方法进行制备。 　　1.5冰冻汇集滤白血小板 　　1.5.1 DMSO保护剂的加入 将制备完成的汇集滤白血小板称重，去皮，按照5%的比例计算出需加入DNSO的量，在百级净化间内或超净台内采用无菌技术，用一次性注射器抽出DMSO备用，然后采用无菌技术将血小板袋与一次性延长管连接，再连接注射器，将注射器安装在滴定仪上，设定速度为每分钟1ml，血小板袋放在摇床上，设定速度每分钟50次，开启滴定仪、摇床。加药后产品终浓度为5%，血小板袋温度应无明显变化。 　　1.5.2低温保存 将加好DMSO的汇集滤白血小板装盒后直接放入-80℃冰冻保存。要单层放置，不能叠放。 　　1.5.3解冻 使用前把冰冻汇集滤白血小板从深低温冰箱中取出，在3