35例NKNKT细胞肿瘤生物治疗护理体会.docVIP

精品论文 参考文献 35例NKNKT细胞肿瘤生物治疗护理体会 王红玲 王盛（通讯作者） 刘莹 孙力君 　　【摘 要】 目的 总结我院35例自体NK/NKT细胞肿瘤生物治疗全过程护理体会。方法 35例非禁忌症恶性肿瘤病人，抽取自体静脉血并分离外周血单个核细胞，体外培养NK/NKT细胞，连续输注4次为一疗程，同时加强NK/NKT细胞输注过程中及输注后不良反应的观察和护理。结果 35例病人顺利完成抽血、输注过程，输注后2例病人在2-5h后发热。结论 NK/NKT细胞临床应用安全可靠。 　　【关键词】 NK/NKT细胞； 体会 　　自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)是机体重要的免疫细胞，是先天性免疫系统的重要组成分，是机体抗御感染和防止细胞恶性转化的重要免疫调节细胞。与T淋巴细胞不同，NK 细胞无需肿瘤特异性抗原识别便可以直接杀伤肿瘤细胞，是肿瘤免疫治疗的重要效应细胞，NK 细胞也会抑制肿瘤附近新血管的增生，因此可限制肿瘤取得所需要的养份进而限制肿瘤生长。NKT细胞是NK细胞和T细胞的综合体，同时具有NK细胞的非特异性杀伤功能和T细胞的特异性杀伤功能。我院从2015年3月至2016年1月应用自体NK/NKT细胞治疗35例恶性肿瘤病人，取得了良好的疗效。现将治疗过程中护理心得体会介绍如下： 　　治疗过程： 　　术前向病人介绍治疗过程并签署治疗同意书，血细胞分离机采集外周血中的单个核细胞浓缩液30ml，在GMP实验室中用淋巴细胞分离液2000rpm离心20min分离纯化单个核细胞（PBMC），收集中间白膜层PBMC，用PBS溶液1600rpm离心5min洗涤3次后重悬于20ml无血清培养基（加2%自体血清）中，加到终浓度为1ug/ml抗人CD3单克隆抗体、终浓度为1ug/ml抗人CD28单克隆抗体和终浓度为12.5ug/ml重组人纤维连接蛋白的包被液包被过夜的75 cm2细胞培养瓶中，加入1000U/ml重组人白细胞介素-2 （rhIL-2）、20ng/ml重组人白细胞介素-15（rhIL-15）置于37℃，5%CO2培养箱孵育，定时显微镜下观察细胞，培养到4天左右转入175cm培养瓶，补加rhIL-2、 rhIL-15，以后根据细胞数量和培养液颜色每1-2天换液，并补加rhIL-2、 rhIL-15，培养12-15天，手持式细胞计数器计数，数量达到1times;1010个以上输注病人。台盼蓝染色检测细胞活力应在95%以上，同时采用流式细胞仪检测细胞免疫表型CD3、CD16、CD56的表达，在病人输注前，取培养液用丫啶橙染色或革兰染色，追加一次污染检测。此外，对每一批细胞终制剂均要留样冻存。 　　全过程护理心得体会 　　1．血细胞分离机采集患者自体外周血单个核细胞体会 　　1.1 使用美国血液技术公司提供的MCS+血细胞分离机及其配套的一次性管路耗材采集患者自体外周血单个核细胞， MCS+设备采用单针穿刺方式，采血、输注均经同一血管和针头，因此首选肘部粗大、弹性好、易于固定且较为平坦的静脉穿刺，如肘部静脉穿刺困难，可改用股静脉穿刺或由医生帮助行颈内静脉插管。穿刺成功后应重点加强针头的保护，用胶布固定针头，取消毒纱布保护针眼处，再加创可贴固定[1]。 　　1.2 防止枸橼酸中毒：由于抗凝剂中含有枸橼酸盐可与血液中的钙离子结合，引起低血钙，因此在采集过程中，要不断观察患者有无口周部麻木、肢体抽搐等枸橼酸钠中毒症状。为防止枸橼酸钠中毒反应，于采集开始时口服葡萄糖酸钠10mg/10ml 2支。 　　1.3 采集过程中一旦出现心慌、头晕症状时应及时采取平卧位，双腿屈曲，瞩其深呼吸并尽量放松，同时减慢采集速度，一般会很快恢复，如出现面色苍白、冷汗、恶心、呕吐等症状时应立即终止采集，按键输注，取头低足高位，必要时按压门中、内关等穴位，症状缓解后适量补充水分。采集完成后，取无菌棉球覆盖穿刺处，瞩患者抬高手臂，用食指、中指、无名指三指并拢按压30min，避免形成血肿，淤血等，30min后观察。若针眼处无渗血，改用创可贴贴于针眼处防护[2]。。 　　2．细胞输注及护理体会 　　2.1 NK/NKT细胞在输注前常规加入白蛋白有效防止细胞凝聚成团，但是无法绝对保证所有NK/NKT细胞均处于游离的单细胞状态，输注时采用输血器，因为输血器存在内置滤网，可充分过滤成团细胞，可有效减少输注细胞阻塞情况的发生，使用8-9号头皮针，不能使用太细的针头(NK/NKT细胞太大无法通过细针头)。 　　2.2 NK/NKT细胞输注时严格控制滴速，先慢后快，开始10min内保持滴速30滴／min，观察患者无反应再根据患者的体质情况以40-60滴／min输入，对有些心肺功能不全者，滴注速度应尽量缓慢，输注过程尽量不超过60min。输注