内毒素作用下淋巴细胞中CD4＋CD25＋调节性T细胞变化及连翘对其的影响.pdfVIP

中国现代医药杂志2014年 2月第 16卷第 2期 MMJC，Feb2014，Vol16，No．2 · 5 · 内毒素作用下淋巴细胞中CD4+CD25+调节性 T细胞变化及连翘对其的影响 温勃 阳 李文星 熊泽翼 张毅 段吉明 申素纲 魏星 【摘要】 目的 探讨不同时间点内毒素(LPS)对CD4+CD25调节性T细胞 (CD4+CD25regulatoryTcell，Treg)的影响 及连翘 (forsythiasuspensa，FS)干预后 CD4+CD25调节性 T细胞 的变化 。方法 体外培养 Wistar大 鼠脾脏淋 巴细胞 ，分为对 照组、LPS(10ng／m1)组、LPS(10ng／m1)+多黏菌素 B组 (101xg／m1)、LPS(10ng／m1)+连翘 (12．5、25、50mg／m1)组 ，分别于3、6、12h 收集标本 ．流式细胞术检测 CD4CD25调节性 T细胞在淋巴细胞中的百分 比，荧光定量 RT—PCR法检测 Foxp3mRNA表达 ， 酶联免疫 吸附试验 (EUSA)法检测 TNF— 、IL一10分泌水平 。结果 脾脏淋 巴细胞 中CD4CD25~Treg的百分 比和 Foxp3mRNA的表达在 12h较 3、6h明显升高 (P0．O1)；TNF—O／、IL一10的分泌随时间点的延长均显著升高 (P0．O1)；随连翘 剂量增加，TNF一 、IL一10分泌水平，Foxp3mRNA表达和 CD4+CD25qreg百分比均明显降低 (P0．05)。结论 内毒素参与并 诱导了CD4+CD25qYeg在淋 巴细胞 中的变化 ，其随内毒素作用时间延长呈上升趋势。连翘能显著降低 CD4+CD25+Treg在淋 巴细胞 中的百分 比。 I关键词】 重症急性胰腺炎 内毒素 调节性T细胞 连翘 ChangeofCD4CD25~rregsamonglymphocytes、】lriththefunction ofendotoxinandtheinfluenceonthem witllthead- ditionofForsythiasuspensa WenBoyang，LiWenxing，XiongZeyi，eta1．ShanxiMedwd University，Taiyuan030001 A【bstract】 objective TodiscusstheinfluenceofLPSonCD4+CD25qregsduringdifferenttimeandthevariationof CD4+CD25~Fregsafterforsythiasuspensaintervention． M ethods SpleenlymphocytesofWisterratsininvitrocultivationwere allocatedintocontrolgroup，LPSgroup，LPS (1On#m1)+PloyB (10txg／m1)groupandLPS (10ng／m1)+AFS(12．5，25，50mg／m1) group，respectivelycollectedsamplesafter3，6，12hours．TheproportionofCD4CD25~Fregsamonglymphocyteswasdetected byFlow Cytometry．RT-PCRmethodwasusedtodetecttheexpressionofFoxp3mRNA inlymphocytes．Thesecretionlevelof TNF— ．IL—l0wasdefectedamonglymphocytesbytheapplicationofELISA． Results TheproportionofCD4CD25~Tregsand theexpressionofFoxp3mRNA amongSpleenlymphocytesafter12hours hadmoreobviousimprovementthantheproportionand theexpressionafter3，6hours (尸0．O1)．ThesecretionIevelofbothTNF一仅andIL—10enhancedobservablywit}lthetimeof lengthydelays(P0．01)．ThesecretionlevelofTNF—Ot，IL-10，theexpressionofFoxp3mRNA andthepercentageofCD4CD25 Tr