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RP-HPLC法测定迷迭香提取物中鼠尾草酸含量
RP-HPLC法测定迷迭香提取物中鼠尾草酸含量
【摘要】 目的建立迷迭香提取物中鼠尾草酸含量测定的方法。方法外标一点法。Hypersil ODS柱为色谱柱,流动相乙腈-0.1%磷酸溶液(60∶40),柱温度30℃,流速1.0ml/min,检测波长285nm,进样量10μl。结果鼠尾草酸能很好地分离。鼠尾草酸的线性范围为0.0442~0.8420 mg/ml(R=0.9997)。加样平均回收率为97.96%(n=9),RSD为1.1%。结论该方法简便、快速、重复性好,适用于本品中鼠尾草酸的含量测定。
【关键词】 迷迭香提取物 鼠尾草酸 高效液相色谱 含量测定
【Abstract】ObjectiveTo establish a method for the determination of the content of carnosic acid in rosemary extracts.MethodsAn external standard method by RP- HPLC Hypersil ODS C18 column and acetonitrile-0.1%phosphoric acid (60:40)as mobile phase.The column temperature was 30℃.The flow rate was 1.0ml/min.The detection wavelength was 285nm and the injection volume was 10μl. ResultsThe linear range of carnosic acid were 0.0442~0.8420mg/ml(R2=0.9995),average recovry of rosemary extracts were 97.86% and RSD=1.1%(n=9).ConclusionThis method was simple,rapid and accurate.It is suitable to be adopted for quantitative analysis of carnosic acid in rosemary extract
【Key words】rosemary extracts; carnosic acid;high performance liquid chromatography;content determination
迷迭香Rosmarinus officinalis L系唇形科迷迭香属植物,其主要成分主要有二萜类、黄酮类、三萜类化合物和精油,现多作为抗氧化剂及香料用于食品、化妆品、医药领域[1]。迷迭香中所含的二萜酚类成分有明显的抗氧化、防腐、抗菌、抗肿瘤等活性,其中鼠尾草酸的活性最强[2]。迷迭香提取物(Extractum rosemary siccus)是迷迭香的叶、花和植株的各部分切碎之后,先提取精油后,用适宜的溶剂提取获得。本品具有阻止或延缓其他各类产品的氧化变质,提高稳定性,延长贮存期,确保其他产品的商品稳定。
1仪器与试药
美国安捷伦高效液相色谱仪Agilent 1100(Agilent 1100四元泵、Agilent 1100真空脱气泵、Agilent 1100VWD检测器、Agilent 1100色谱工作站);CBL100型柱温箱;0.45μm滤膜,十万分之一CP255D型电子天平。鼠尾草酸对照品(天津一方科技有限公司);乙腈为色谱纯,甲醇为分析纯,磷酸为分析纯,水为超纯水;迷迭香提取物(海正药业试制)批号为:060801、060802、060804、060805、060806
2色谱条件
色谱柱为依利特Hypersil ODS (5μm 4.6×250mm )流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(60∶40);紫外检测波长285nm,流速:1.0ml/min;柱温:30℃,进样量10ul,在上述色谱条件下进样分析,鼠尾草酸与其他成分达到基线分离,与其相邻缝的分离度大于1.5,计算理论板数按鼠尾草酸大于10000。色谱图见图1。
3.1对照品溶液的制备精密称取鼠尾草酸对照品适量,加甲醇溶解制成浓度为0.17mg/ml的溶液即得。
3.2供试品溶液的制备精密称取本品适量,加甲醇溶解制成浓度为1.15mg/ml的溶液,进样前用0.45μm滤膜过滤,即得。
3.3归一化法测定鼠尾草酸对照品含量加甲醇配制成浓度为0.8420mg/ml,6次进样按平均峰面积计算得鼠尾草酸含量为93.22%。本对照品系购于天津一方科技有限公司,因此作含量的标定。
4方法与结果
4.1线性关系考察精密称取鼠尾草酸对照品,用甲醇配置成浓度为0.0442
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