HRTⅡ代-Rostock角膜模块对正常人眼角膜缘及中央角膜观察.docVIP

HRTⅡ代/Rostock角膜模块对正常人眼角膜缘及中央角膜观察 　【摘要】 目的：用HRTⅡ代/Rostock角膜模块对正常人眼角膜结构进行观察和分析。方法：应用激光共焦显微镜对46例（92眼）正常人的中央角膜，上下方角膜缘进行检查分析。结果：上下方角膜缘可观察到Vogt栅栏状结构，并可动态观察到血细胞在血管内流动。上下方角膜缘表层上皮细胞密度低于中央表层上皮细胞（Plt;0.05）。Langerhans细胞（Lcs）位于角膜35~60 μm处，其形态表现为细胞核较大且树枝状突起较多或者核较小且突起较少，可能分别代表Lcs处于成熟和未成熟状态。Lcs平均密度角膜缘明显高于角膜中央，角膜中央Lcs不可计数。正常人角膜上皮基底细胞下层神经排列较规则，平行走行，深层神经纤维较浅层神经纤维粗大，弯曲度小，少见分支，纤维之间的交联很少，神经串珠清晰可见。角膜中央前基质细胞与后基质细胞平均密度相比较，差异有统计学意义（Plt;0.05）。角膜中央厚度为551±39 μm。结论：激光共焦显微镜能在三维空间、实时、活体条件下对角膜组织进行无损伤的光学断层扫描成像，观察角膜各层细胞、神经及胶原等形态结构，并可研究其动态变化，具有广阔的应用前景。 【关键词】 角膜；Langerhans细胞；激光共焦显微镜 海德堡视网膜断层扫描系统Ⅱ代（HRTⅡ）是利用共聚焦激光的原理获取和定量分析眼后节三维形态的仪器，通过增加Rostock角膜模块组（RCM），HRTⅡ可以转变成共焦激光角膜显微镜，用来获取和分析角膜各层面二维图像和整个角膜的三维图像。我们应用HRTⅡ代/RCM检查了92个正常人角膜，为进一步研究各种角膜疾病提供参考，现报告如下。 1 对象和方法 1.1 研究对象 46例受检者（92眼）来自2006年10月~2007年2月在南通大学附属医院眼科接受屈光手术术前检查及常规体检者，其中男20例，女26例，年龄20~61岁，平均38.3±10.9岁。所有受检眼均无外伤、感染及配戴接触镜史，经裂隙灯显微镜检查角膜透明，检眼镜检查无异常。作为正常健康眼入选本研究。 1.2 激光共焦显微镜检查 表面麻醉后滴50 ul Vidisic眼凝胶(美国博士伦公司生产)于物镜头表面，盖上一次性无菌角膜接触帽；移动固视灯令其向下看，在CCD摄取的监控图像的指导下，调整物镜位置直至激光光束位于上方角膜缘中央；前移物镜至接触帽与之轻微接触，预设置两者接触的焦平面深度为0 μm；转动焦平面调节环以获得角膜不同深度不同层次的图像；根据所获图像的真实焦平面位置(深度用μm数表示)进行调整；移动固视灯改变被检者注视方向，检查上方角膜缘，中央角膜及结膜细胞；选择有价值的图像与录像存盘。 1.3 图像分析与统计参数 利用HRTII/RCM软件分析系统，计算角膜各层细胞的平均密度。其中将角膜上皮分为3层：表层上皮细胞层、翼状上皮细胞层（角膜基底上皮细胞层之前30 μm处）和基底上皮细胞层，分别计算中央角膜及上下方角膜缘表层上皮细胞层，中央角膜翼状上皮细胞层，基底上皮细胞层的细胞平均密度；将角膜基质层分为两段，计算前基质层（近Bowman膜基质层），后基质层（近Descemet膜最后一层基质层）扫描图像的细胞密度；分析角膜上皮基底细胞层下的神经，1幅图像内所有神经纤维分支的总数量为神经数量(支／幅)；计算上下方角膜缘Langerhans细胞及中央角膜内皮细胞的平均密度；角膜厚度是指角膜接触帽到内皮细胞之间的距离（μm）。 1.4 统计学方法 用Rostock操作软件进行细胞计数，数据统计用x±s表示，每两组细胞平均密度数值之间统计学差异应用配对t检验，以Plt;0.05作为差异有统计学意义。 2 结 果 共焦显微镜检查的92眼中，获得角膜中央上皮表层细胞图像20眼（21.7％），获得角膜缘表层上皮细胞图像29眼（31.5％），获得角膜缘Langerhans细胞图像59眼（64.1％），获得角膜中央Langerhans细胞图像28眼（30.4％），获得角膜上皮翼状细胞层、基底细胞层、前基质层和后基质层图像92眼(1O0.0％)，获得内皮图像90眼(97.8％)， 对所有图像进行形态学和细胞密度分析如下。 2.1 上皮层 正常的表层上皮细胞（图1）排列疏松，边界清晰，呈多角形，以六边形为主，胞核明亮。角膜中央表层上皮细胞平均密度为1124±290个/ mm2，上下方角膜缘表层上皮细胞平均密度分别为847±302个/mm2和803±293个/ mm2。上下方角膜缘表层上皮细胞密度相比较差异无统计学意义（t=0.98，Pgt;0.05)，但低于中央表层上皮细胞（t=12.61，Plt;0.05）。翼状细胞（图2）呈多角形，细胞向侧面延伸变细，形似翼状，边界清晰，胞核反光较弱。