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RhD阳性血影细胞制备及应用 　 作者：石明隽，肖瑛， 桂华珍， 张国忠 【摘要】 　　目的： 探讨用不同渗透浓度磷酸盐液（PB）制备的RhD阳性血影细胞的抗原性及其在抗-D 抗体分离中的作用。方法： 用不同渗透浓度PB作为裂解液，将遗传表现型为CCDee的RhD阳性O型红细胞制备成血影细胞，观察其抗原性；以血影细胞为固相抗原，用亲和层析法从抗D含量为0.814 mg/L的健康人血浆中分离抗-D抗体，检测相关指标。结果： pH7.4、30 mmol/L PB制备的血影细胞形态完整，保持较强的抗原性；成功获得抗-D抗体，回收率达到84.65 ％，IgG单体加二聚体含量为99.3 %，不含抗A、抗B血型抗体以及IgA、IgM和血红蛋白。结论： 用pH7.4、30 mmol/L PB制备的血影细胞可作为固相抗原，并能从低效价血浆中分离纯化抗-D抗体。 【关键词】 RhD抗原 抗-D抗体 血影细胞 血浆 　　［Abstract］ Objective: To investigate the antigenicity of RhD ghost cells prepared with different concentrations of phosphate solution (PB) and its application in the separation of antiD antibody from plasma with low antibody titer. Methods：Red blood cells of O group with positive RhD (genotype CCDee) were employed to prepare ghost cells using PB with concentrations of 40, 30 and 20 mmol/L respectively. Antigenicity of these cells was examined. AntiD antibody was separated from the plasma containing 0.814 mg/L of antiD by using affinity chromatography (AC) with the ghost cells as solid antigen. Results： 1. The ghost cells prepared with PB (pH 7.4, 30 mmol/L) kept complete cell morphology and strong antigenicity; 2. The antiD antibody was separated successfully using AC method from plasma. The recovery rate of antiD was 84.65%, and contents of monomer and dimmer reached 99.3% of total IgG. No IgA, IgM or hemoglobin was found in the preparation. Conclusion： The ghost cells prepared by PB (pH 7.4, 30 mmol/L) can be used as solid antigen to separate and purify antiD antibody from plasma with low antiD titter. 　　［Key words］ RhD antigen，antiD antibody; ghost cells; plasma 　　抗-D抗体被广泛用于防止RhD同种免疫[1,2]，同时也用于治疗特发性血小板减少性紫癜[3,4]。目前临床使用的抗-D抗体均为人为免疫而得的血源制剂[5]，而因妊娠等自然免疫而产生的获得性抗D抗体，由于其血液中含量少，没有受到重视而得到利用。2006年用不同渗透浓度的磷酸盐液（PB）制备RhD阳性血影细胞，并探讨其对血影细胞抗原性的影响，探索用血影细胞从含低效价抗-D抗体的血浆中分离纯化抗体的方法及其可用性。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　健康人血浆（抗D为0.814 mg/L，IgG含量9.63 g/L，贵州省血液中心），Rh表型CCDee的O型红细胞（贵州省血液中心），效价为1∶256的抗D（IgG）血型抗体标准品（上海市血液中心），溶血素（中国生物制品质量检测所），FITC-兔抗人免疫球蛋白（晶美公司），MININEPHTMIgG抗血清（英国The Binding si