RNA结合蛋白Sam68 mRNA在原发性肝癌中表达及意义.docVIP

RNA结合蛋白Sam68 mRNA在原发性肝癌中表达及意义 　 作者：马高祥 傅利锋 王涌 吴育连 【摘要】 目的 探讨RNA结合蛋白Sam68 mRNA在人原发性肝癌组织中的表达及意义。方法 选取20例原发性肝癌的肿瘤组织及相应癌旁组织，采用TRIzol一步法提取总RNA，采用RT-PCR法检测Sam68 mRNA在肝癌组织及相应癌旁组织中的表达。 结果 PCR产物电泳显示肝癌组织中Sam68 mRNA平均表达强度为60.71％±9.26％，相应癌旁组织中Sam68 mRNA平均表达强度为76.98％±11.61％，经配对t检验，P＜0.05，具有统计学差异。 结论 与相应癌旁组织相比，人原发性肝癌组织中Sam68 mRNA的表达明显降低，提示在人原发性肝癌组织中Sam68的表达在转录水平受到明显抑制。 【关键词】 肝癌 RNA结合蛋白 聚合酶链反应 　　【Abstract】Objective To discuss the expression of sam68 in primary heptocarcinoma ant its significance.. Methods 20 cases of tumor tissues and corresponding near-tumor tissues of human primary hepatocellular carcinoma were collected. Total RNA was extracted from specimens using TRIzol one-step method, the expression level of sam68 in both of tumor tissues and corresponding near-tumor tissues were observed with reverse tranctiption-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results Examined by ultraviolet spectrophotometer, the mean expression level of sam68 was 60.71％±9.26％ in tumor tissues, and 76.98％±11.61％ in near-tumor tissues. By match data test, P＜0.05, indicated the difference had statistic significance. Conclusion Comparing to responding near-tumor tissues, the amounts of sam68 mRNA expression were lower in human primary hepatocellular carcinoma. It shows that the expression of RNA-binding protein sam68 is inhibited at transcription level in human hepatocellular carcinoma. 　　【Key word】hepatocellular carcinoma RNA-binding protein polymerase chain reaction(PCR) 　　Sam68是STAR蛋白家族的代表成员之一, 目前关于Sam68的报道仅限于国外研究，且大多以序列结构分析及相关配体检测为主，而Sam68与各种恶性肿瘤的相关性研究较少，在原发性肝癌中的表达情况国内外少见正式报道。 本研究通过半定量RT-PCR技术，首次明确了RNA结合蛋白Sam68 mRNA在人原发性肝癌中的表达情况，为进一步研究STAR蛋白在肿瘤形成和发展过程中的作用机制提供了一定的理论基础。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　20例原发性肝癌的肿瘤组织及相应癌旁组织取自浙江大学医学院附属二院病理科新鲜冰冻标本,主要试剂TRIZOL （Invitrogen公司）MMLV（逆转录酶）和Taq DNA polymerase （Promega公司）dNTP（上海博亚生物技术公司），DEPC （GIBCO公司） Agarose （AMRESCO公司）DNA Marker DIL2000（Takara公司） 乙醇、氯仿、异丙醇、溴化乙锭及其他试剂均为国产或进口纯试剂。 　　1.2 方法 　　(1)细胞总RNA提取（RNA extraction）取20例原发性肝癌的肿瘤组织及相应癌旁组织分成20对样本，碾磨成粉,采用TRIzol一步法提取总RNA。(2)