广东猕猴桃种质资源RAPD聚类分析.pdfVIP

· 生物技术 · 北方 园艺2008(11)：134～138 广 东猕猴批种 质 资源 RAPD 聚类 分析 陈 晓玲，谢 振 文，梁 红 (仲恺农业技术学院生物技术研究所，广东 广州 510225)· 摘 要：为了探讨广东省和平县猕猴桃栽培品种和野生种之间的亲缘关系和类群聚合，试验 采用优化后的猕猴桃 PD分子标记方法，对源 自广东省和平县的21个猕猴桃品种 (引进和野 生)进行分子多态性比较和聚类分析。结果表明：猕猴桃种间的相似性系数为 6596／～9O ，依据 不同的相似性系数水平把 21个种及品种分为不同的类群、所聚类群与传统的形态学分类有一定 的差异；猕猴桃野生种与栽培品种之间有较大的差异，但 中华猕猴桃和美味猕猴桃 2个种内的各 个栽培品种在聚类上互有交叉。黄毛猕猴桃品种与毛花猕猴桃、京梨猕猴桃、阔叶猕猴桃等野生 种之间差异小，亲缘关系较接近，推测可能起源于同一个祖先种。广东和平县猕猴桃属植物类型 丰富，具有较高的遗传多样性。 ． 关键词：猕猴桃；聚类分析；遗传多样性；R D 中图分类号：S663．402．4 文献标识码：A 文章编号：1001--0009(2O08)l1—0134一O5 猕猴桃属 (ActinidiaLind1．)隶属于猕猴桃科 (Ac— 布和系统进化，以期能为猕猴桃资源的开发利用，发展 tinidiaceae)，为多年生藤本植物，雌雄异株，是一种重要 区域猕猴桃产业提供一些科学依据。 的水果资源。全世界现有猕猴桃属66个种，其中62种 1 材料与方法 原产中国[】。广东省有猕猴桃属植物分布的县 (市)达 1．1 植物材料 42个，其中粤北山区种类最多，资源最丰富 。和平县 采用的试验材料取 自广东省和平县水果研究所品 地处粤东北山区，其西北面与江西定南县接壤，是我国 种园，嫁接于仲恺农业技术学院实验场内。取冈0展开的 美味猕猴桃、中华猕猴桃的 自然分布区之一，也是广东 幼叶为提取DNA的材料，即取即用。 省唯一的猕猴桃产区[5]。该县 2O个乡镇都有野生猕猴 1．2 试剂 桃分布，共有5个野生品种 ：灰毛猕猴桃、黄毛猕猴桃、毛 Taq酶(5U／L)、dNTP(浓度为 10t~mol／L)、琼脂 花猕猴桃、多花猕猴桃、京梨猕猴桃 ；猕猴桃的种植已遍 糖 、EB、Tns、PVP等购于上海生工公司，RNA酶和DNA 布全县各个乡镇 ]。 marker购于北京鼎国生物技术公司。试验共使用了5O 黄宏文等研究表明猕猴桃属植物从形态性状、营养 个随机引物，长度为1Obp，均由上海生工公司合成。 成分、性别到染色体倍性变异都有很高的多样性 ，存在 1．3 主要设备 着丰富的遗传多样性L2]。Huang、陈万秋等通过同工酶 2400型PCR扩增仪 (pekinElmer公司)，紫外分光 研究表明猕猴桃在栽培品种和物种水平都存在高度的 光度仪 (Phamacia公司)，凝胶成像系统(BIO—RAD公 多样性 ]。猕猴桃属植物的遗传多样性研究虽然取得 司)，电泳装置 (北京六一仪器厂)。 了很大的进展，然而在分子水平研究资料还不多，特别 1．4 DNlA提取 是对县域范围内的猕猴桃属植物进行种内和种间遗传 基因组 DNA提取参照陈万秋等Lg方法，略加修改 多样性研究还未见报道。现拟在对广东省猕猴桃产区 称为改良SDS法。取幼叶1g加液氮研磨成粉，再加入 和平县猕猴桃资源进行形态学观察和同工酶分析的基 2n1LSDS提取液 (1_25 SDS，100mmol／LTris—H(21， 础上进一步从分子水平上研究其猕猴桃的分类、区域分