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安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2009,37(10):4394-4395,4398责任编辑 常俊香 责任校对 吴晓燕优化醋酸钾(KAC)法提取蚜虫基因组DNA1,漆永红2,刘永刚2,张正英1 赵丽娟(1.甘肃农业科学院生物技术研究所,甘肃兰州730070;2.甘肃农业科学院植物保护研究所,甘肃兰州730070)摘要 [目的]探索一种简便、有效的单头蚜虫基因组DNA提取方法。[方法]以从不同地区采集的桃蚜为试材,采用改进的KAC法和优化的KAC法提取单头桃蚜的基因组DNA,用紫外分光光度计测定所提DNA的浓度(以OD260/280表示),用0.8%琼脂糖凝胶电泳检测所提DNA的纯度,比较2种方法的提取效果;对优化KAC法所提DNA进行PCR扩增和电泳检测。[结果]优化KAC法提取的单头蚜虫基因组DNA的OD260/280为1.6～1.9,浓度为20～50ng/g;改进KAC法提取的单头蚜虫基因组DNA的OD260/280为1.4～1.7,浓度为8～25ng/g;来自同一地方桃蚜的基因组DNAPCR扩增产物的电泳条带基本相同。[结论]优化改进的KAC法提取的桃蚜基因组DNA浓度和纯度均较高。关键词 基因组DNA;桃蚜;提取方法;优化中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)10-04394-02ExtractionofGenomeDNAofAphidbyOptimizedPotassiumAcetate(KAC)ZHAOLi2juanetal (InsitituteofBio2technique,GansuAcademyofAgriculturalScience,Lanzhou,Gansu730070)Abstract [Objective]TheaimwastoexploreasimpleandeffectiveextractionmethodforextractinggenomeDNAofsingleaphid.[Meth2od]Withpeachaphidsfromdifferentareasasthetestedmaterials,theimprovedKACmethodandoptimizedKACmethodweretakentoex2260/280)wasdeterminedbyultravioletspectrophotometeranditspuri2 tractthegenomeDNAofsingleaphids.Theconcn.ofobtainedDNA(ODtywasdeterminedby0.8%agarosegelelectrophoresis.Theextractioneffectsof2methodswerecompared.TheDNAobtainedbyoptimizedKACmethodwasamplifiedwithPCRanddetectedbyelectrophoresis.[Result]TheOD260/280ofsingleaphidsgenomeDNAextractedwithop2timizedKACmethodwas1.6-1.9anditsconcn.was20-50ng/g.TheOD260/280ofsingleaphidsgenomeDNAextractedwithimprovedKACmethodwas1.4-1.7anditsconcn.was8-25ng/g.TheelectrophoresisstripofPCRamplificationproductsofsingleaphidsgenomeDNAfromthesameareawassimilar.[Conclusion]Theconcn.andpurityofaphidsgenomeDNAextractedwithoptimizedKACmethodwerehigher.Keywords GenomeDNA;Peachaphid;Extractionmethod;Optimization 蚜虫(Aphidinea)为同翅目(Homoptera)蚜总科(Aphidoidea)1 材料与方法和球蚜总科(Adelgoidea)昆虫,世界已知4700余种[1],我国1.1 材料[2]。大多数蚜虫为重要蚜虫资源丰富,已知的有1000余种1.1.1 样品采集与保存。供试桃蚜(Myzuspersicae(Sulzer))[3],但也有少数种类的蚜虫如五倍子蚜的农林经济植物害虫于2007～2008年采自甘肃省武威市、定西市、天水市等13个(Schlechtendaliachinensis(Bell))是具有较高经济价值的资地区的马铃薯植株。将从各地
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