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培养基基本成分—有机成分 维生素:以各种辅酶的形式参与多种代谢活动,对生长、分化等有很好的促进作用。虽然大多数的植物细胞在培养中都能合成所必需的维生素,但在数量上不足,通常需加入一至数种维生素。 常用的维生素包括:VB1、VB6、Vc、有时还使用生物素、叶酸、VB12等。VB1对愈伤组织的产生和生活力有重要作用,VB6能促进根的生长。Vc有防止组织变褐的作用。 细胞工程-植物细胞工程 1.3 培养基及其配制 培养基基本成分—有机成分 肌醇:本身没有促进生长作用,但在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的作用;因而能促进培养物快速生长;能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用,对细胞壁的形成也有作用。 腺嘌呤:合成细胞分裂素的前体物质之一。添加腺嘌呤能促进细胞合成分裂素,有利于细胞的分裂和分化,促进芽的形成 其它:天然提取物,如酵母提取物,番茄汁。 细胞工程-植物细胞工程 1.3 培养基及其配制 培养基基本成分—植物激素 植物激素(Phytohormone):是植物自然状态下产生的、对生长发育有显著作用的微量有机物。能影响生长和分化。 在个体发育中,不论是种子发芽、营养生长、繁殖器官形成以至整个成熟过程,主要由激素控制。 植物体内的激素与细胞内某种称为激素受体的蛋白质结合后,影响DNA、RNA和蛋白质的合成,并对特殊酶的合成起调控作用,从而表现出调节代谢的功能。 细胞工程-植物细胞工程 1.3 培养基及其配制 培养基基本成分—生长素(auxin) 生长素是由色氨酸通过一系列中间产物形成的。 ?离体培养中,生长素的主要生理作用是促进细胞分裂和生长,有利于外植体脱分化并启动细胞分裂,有利于形成愈伤组织。 在离体培养的分化调节中,生长素促进不定根的形成而抑制不定芽的发生。在液体培养中,生长素还有利于体细胞胚胎发生。 ? 常用的生长素有:吲哚乙酸(IAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)等。IAA活力较弱。NAA起动能力要比IAA高出3-4倍。IBA是促进发根能力较强的生长调节物质。NAA和IBA广泛用于生根,并与细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。2,4-D起动能力比IAA高10倍,特别在促进愈伤组织的形成上活力最高,但它强烈抑制芽的形成。 细胞工程-植物细胞工程 1.3 培养基及其配制 培养基基本成分—细胞分裂素(Cytokinin) 细胞分裂素大多是嘌呤族衍生物,自然状态下分裂素主要在根中形成,茎端、萌发中的种子、发育中的果实和种子也能合成分裂素。 生理作用主要是诱导芽的分化促进侧芽萌发生长、促进细胞分裂与扩大。多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的增殖,而在生根培养时使用较少或用量较低。 主要有激动素(KT)、6-苄基腺嘌呤(BA)和玉米素(ZT)等。其中最常用的是6-苄基腺嘌呤。其中ZT活性最强,但昂贵,常用的是6-BA。 细胞工程-植物细胞工程 1.3 培养基及其配制 培养基基本成分—赤霉素类 一类广泛存在于植物体内的激素,目前已发现的天然赤霉素有20多种。 自然植物体内的赤霉素具有促进细胞伸长生长、诱导花芽形成、打破种子休眠以及诱导单性结实等生理功能。 商品生产的赤霉素多为赤霉酸(gibberellicacid,GA3 )。 在离体培养条件下,赤霉素的主要作用是促进细胞的伸长生长,与生长素协调作用对形成层的分化具有一定影响,同时还能刺激体细胞胚进一步发育成植株。 细胞工程-植物细胞工程 1.3 培养基及其配制 培养基基本成分—激素配比 生长素/细胞分裂素: 高:有利于根的形成和愈伤组织的形成 适中:有利于根芽的分化 低:有利于芽的形成 1956年,米勒(Miller)与斯库格(Skoog)一起 提出了植物激素控制器官形成的观点 细胞工程-植物细胞工程 1.3 培养基及其配制 生长素:促进细胞分裂和生长,有利于外植体脱分化并启动细胞分裂,有利于形成愈伤组织 细胞分裂素:促进细胞分裂,调节器官分化,延迟组织衰老,增强蛋白质合成等。 BA(6-苄基腺嘌呤) 分别为每升0、0.1、 5.0mg NAA(奈乙酸) 分别为每升0、0.1、 5.0mg 0 0.1 5.0 细胞工程-植物细胞工程 1.3 培养基及其配制 培养基基本成分—激素配比 培养基基本成分—水 离体培养中,水既是培养基营养成分的溶剂,又是培养基的重要组成部分,它占培养基成分的95%。 根据培养类型及其研究层次不同,可选择使用不同处理级别的水。如原生质体培养、细胞培养以及分生组织培养一般应使用双蒸水或超纯水,以免水中残留的离子造成培养基成分的变化而影响培养效果。如果是大批量的快速繁殖培养,则可使用一般蒸馏水或纯净水以降低

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