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乙型肝炎病毒三种检测结果的临床探析 　　【摘要】 目的 采用酶联免疫吸附法（ELISA）、荧光实时定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和免疫放射分析法（IRMA）三种方法检测乙型肝炎病毒，比较三种方法检出率及之间的关系。方法 分别采用以上三种方法对108例（份）疑似或确诊乙肝患者血清标本进行两对半大小三阳、小二阳进行阳性率检测。结果 57例乙肝两对半大三阳中FQ-PCR和IRMA阳性检测率分别为94.1%和93.7%；而在34例小三阳中，二者阳性检测率分别为33.3%和84.2%；对小二阳阳性检测率则分别为25.0%和58.2%。结论 三种方法比较，FQ-PCR和IRMA对检测乙肝两对半大小三阳、小二阳具有较高的特异性和灵敏性。前两种方法检出率较ELISA高，是对ELISA法更好的完善和补充。 　　【关键词】 乙肝病毒；ELISA；FQ-PCR；IRMA；HBV-DNA 　　病毒性乙型肝炎系乙型肝炎（hepatitis B virus，HBV）引起的具有极强传染性疾病，易发展为HBV慢性感染，最终恶化为肝硬化或肝癌。据报道，68%-80%肝硬化和肝细胞癌患者为慢性乙肝患者[1]。因此，准确诊断及时治疗对预防乙肝传染有重要的临床意义。近年来，临床界对乙肝病毒检测手段研究越来越深入，陆续出现了ELISA、FQ-PCR、IRMA、PCR等检测方法，为提高乙肝病毒诊断准确率提高了多元选择。对此，我院选取了具有代表性的ELISA、FQ-PCR、IRMA三种方法对108例确诊为乙肝患者血清标本进行了乙肝两对半研究，现将结果报告如下： 　　1 资料与方法 　　1.1 临床资料 选取2010年4月――2012年3月在我院感染科门诊及住院收治的108例慢性乙肝患者，全部患者血清HBV-DNA和乙肝表面抗原（HBsAg）均呈阳性，符合第十次全国病毒性肝炎与肝病学术会议制定的诊断标准。其中男64例，女44例；年龄17-75岁，平均40.2岁。108份于清晨空腹采血5ml，1h内分离血清，置于-20℃冻存备用。 　　1.2 方法 　　1.2.1 试剂与仪器 ELISA检测试剂盒选用厦门英科新创科技有限公司产品，BTO-550酶标分析仪由北京普朗仪器有限公司生产；FQ-PCR检测试剂选自安普利生物工程有限公司生产产品，Amplly9800型荧光定量PCR仪同样采用厦门安普利生物工程有限公司产品；IRMA检测试剂选用三维生物工程集团有限公司产品，仪器则选自科大创新股份有限公司中佳分公司生产的ac-91lr放射免疫计数器。 　　1.2.2 方法 从我院抽调具有丰富操作经验的专业人员，对ELISA、FQ-PCR、IRMA等三种检测方法依照试剂盒说明书进行规范操作。HBV-DNA的检测结果5.0×102copies/ml时判定为阳性；FQ-PCRl×l03copies/mL时为阴性。 　　1.3 统计学处理 采用国际标准统计软件包SAS6.0软件进行统计学分析，计量资料数据以（+s）表示，组间比较采取t检验。 　　2 结 果 　　108例乙肝两对半阳性血清中FQ-PCR、IRMA检测结果，详见表1。 　　3 讨 论 　　乙型肝炎直接致病因子是乙型肝炎病毒，其也是原发性肝癌的诱发因子。据统计，我国乙型肝炎病毒感染率高达10%，在一些地区乙型肝炎病毒感染率甚至达到65.4%之高，说明我国慢性乙肝患者数量已有数千万之巨。另外乙肝病毒具有极强的传染性，HBV感染又是致肝细胞癌病变的重要因素之一，有统计世界范围内有53%肝癌系HBV感染所致，因此加强对重点人群乙肝病毒的检测以实现传染源控制，具有重大的临床意义和社会意义。 　　ELISA法（酶联免疫吸附法）是临床诊断HBV感染的传统手段，可快速简便筛选出乙型肝炎与慢性乙肝肝炎患者，而区分二者则主要依赖乙肝五项（HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb）检测。不过，ELISA检测乙肝五项虽然简便快速，具有较高的准确率，但作为一种半定量检测手段亦存在自身局限，因为ELISA检测HBV感染实际只是检测人体对HBV的免疫反应状态，其结果仅是诊断HBV感染的间接依据。但是如HBeAg，在其阴性样本中仍可检测出HBV阳性，这提示HBeAg阴性反应也有可能代表疾患处于发展过程中，疾病尚在进展，患者仍具备传染性，而只有对HBV-DNA检测才能确诊HBV感染后在体内的复制及预后情况，而FQ-PCR法正是通过检测血清HBV-DNA拷贝数，以反映乙肝患者病毒复制情况，这成为判定HBV感染即预后的重要依据。至于IRMA作为一种定量检测方法，主要通过对检测项数据的反映来掌握病情及预后。 　　本组资料显示，57例两对半大三阳中51例给予FQ-PCR检测，其中检测为阳性48例，阳性率94.1%；