hplc法研究种氟喹诺酮类药物在鸡组织中的残留及消除规律.pdf

摘 要 本研究通过改进HPLC法，检测了3种氟喹诺酮类药物在肉仔鸡组织 中多组分残留，并进一步探讨了肉仔鸡连续4d灌服3种氟喹诺酮类药物 (10mg／Kg．d)后，药物在组织中的消除规律。 实验选择环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星作为检测组分，建立以上 三种氟喹诺酮类药物在肉仔鸡血浆和组织中的多残留检测方法。样品前 处理用磷酸盐缓冲液提取血浆和组织中的氟喹诺酮类药物，过C。。固相萃 取柱净化。高效液相色谱条件为：荧光检测器的激发波长与发射波长分 别是278nm和445nm；柱温400C；流速1．OmL／min；进样量20儿。 1．HPLC检测三种药物残留方法的确立 环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星三种药物的保留时间分别为5．54 好的线性关系，其线性方程分别为： 环丙沙星：C=5．8610S+3．3225(R=O．9998)； 诺氟沙星： C=4．6773S一14．569(R=O．9996)： 恩诺沙星： C=2．6182S+3．9211(R=O．9998)。 各氟喹诺酮类药物在不同组织中的回收率和相对标准偏差(RSD)的 平均值依次为： 6，35％；血浆82．31％、3．08％。 11．19％；血浆83．14％、2．88％。 5．89％；血浆82．58％、4．26％。 实验结果表明，本检测方法具有简便、快速、准确、灵敏及适用范 围广等特点。 2．单次内服氟喹诺酮类药物残留检测的研究 通过单次内服环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星，不同时间范围HPLC法可 分别检测到肉仔鸡血浆和组织中的三种药物原形。实验结果表明： 肉仔鸡单独内服环丙沙星，血药残留达峰快，为2h左右；肌肉中的残留量 在14h左右达最高；肝脏、肾脏组织中的药物残留量在7h左右为最高。24h后， 血浆和组织中的药物残留仍大于最高残留限量(MRLs)。 肉仔鸡单独内服诺氟沙星48h后，血浆和组织中的药物浓度已降低到较低水 平。 肉仔鸡单独内服恩诺沙星，HPLC法检测时，血药残留达峰快，为2h左右； 肌肉中的残留量在14h左右达最高，而且，血浆和肌肉中只有原形药物恩诺沙星 残留；肝脏、肾脏组织中检测时，原形药物恩诺沙星和代谢药物环丙沙星均有残 留，总残留量在肝脏中14h左右达最高，在肾脏中7h左右达最高。 同时，内服单种药物12h后，以上三种组织中残留药物浓度为肝脏肾脏 肌肉血浆。 通过单次内服环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星的混合物，肉仔鸡血药浓 度在12h最高，48h后低于MRLs，3种药物在肾脏组织中均有反弹现象，并且肌 肉中的残留药物消除最快，肝脏中的残留药物消除最慢。 3．连续内服三种氟喹诺酮类药物残留检测的研究 按临床给药剂量，肉仔鸡连续4d内服环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星混合药 物，停药第2d，血浆及组织中均可检测到三种药物；停药第5d，血浆中3种药物 浓度均低于MRLs，而组织中药物残留量较高；停药第10d，诺氟沙星和恩诺沙星 在血浆中检测不到．在肌肉和肝脏组织中残留药物浓度也低于MRLs，环丙沙星在 血浆中的残留量低于MRLs，在肌肉、肝脏、肾脏组织中仍有较高残留；停药第16d， 三种药物在血浆中都未检测到，肌肉中也没有诺氟沙星和恩诺沙星，环丙沙星的 残留量低于MRLs：停药第22d，血浆、肌肉、肾脏中三种药物均未检测到，而环 丙沙星在肝脏中仍有残留；停药第29d，血浆和各组织中都检测不到药物。因此， 诺氟沙星的体药期建议为lOd左右，恩诺沙星、环丙沙星的休药期为16d左右。 关键词：高效液相色谱法 肉仔鸡氟喹诺酮类药物残留检测消除规律 lI ABSTRACT The multiresiduedeterminationmethodofthree in broilerchicken fluoroquinolones tissuesaftera administrationand of three oral