ibv dna苗、dna疫苗-脂质体复合物在鸡体内的分布及安全性研究.pdfVIP

摘 要 DNA疫苗在机体内的分布和安全性是研究者们普遍关注的问题．本研究为 IBVDNA疫苗及脂质体在DNA疫苗中的应用提供了科学依据． 为研究本实验室构建的禽传染性支气管炎病毒(珥^，)真核表达质粒pIBVSI、 和安全性，DNA疫苗经腿部肌肉分点免疫接种7日龄非免疫健康雏鸡，DNA疫 苗．脂质体复合物经腿部肌肉及滴鼻、点眼两种免疫途径接种相同日龄的非免疫 健康雏鸡，利用PCR方法对疫苗在鸡体内的分布及与鸡细胞基因组的整合进行 检测研究．并通过肌肉注射和滴鼻、点眼两种途径对1日龄雏鸡免疫接种DNA 疫苗．脂质体复合物；相同剂量连续免疫接种7日龄雏鸡以及5倍常规使用剂量 (超大剂量)免疫接种7日龄雏鸡，来对DNA疫苗-脂质体复合物进行免疫毒性 实验研究．实验期间对实验鸡进行一般临床表现观察，并分别在免疫后48h和30 日龄进行血液学、血液生化学、病理及病理组织学检测。 分布实验结果表明：肌注DNA疫苗、肌注及滴鼻、点眼免疫接种的D1呵A 疫苗-脂质体复合物均于免疫接种后24h，在血液和所有检测的组织中检测到质粒 疫各组在血液中均已检测不到三种质粒的分布，各组织器官中均检测不到质粒 pIBVSI的分布，DNA疫苗组仅在心脏，肺脏、肾脏、胸腺及注射部位肌肉检测 到质粒pIBVM，pIBVN的分布，DNA疫苗．脂质体复合物肌肉注射组仅在心脏， 疫苗．脂质体复合物滴鼻、点眼免疫组除了在心脏和肝脏中检测不到质粒DNA的 分布外，其余组织中均能检测到质粒pIBVM，pIBVN的分布． 安全性实验表明：纯化后的组织基因组DNA经PCR扩增均呈阴性，未发现 整合现象．试验期间，各组动物行为活动未见异常，无死亡．免疫后48h’单剂 量肌肉注射及清鼻、点跟免疫组的红细胞(砌妃)数量，红细胞压积(HICT)与 著(P如．01)，但都属于正常波动范围内，恢复期间各组血液学指标与对照组相 含量与对照组相比差异极显著(p《o．01)，其余各组血液生化指标与对照组相比 均无显著性差异(，地05)，恢复期间，所有疫苗免疫组血液生化指标均与对照 组无显著性差异(，加．05)，超大剂量接种可能因剂量偏高，在免疫初期对雏鸡 肝脏的蛋白质合成功能造成影响，但后期得以修复．病理剖解无异常变化，各疫 Iy 苗免疫组与对照组相比无明显因疫苗引起的病理变化．综上所述，DNA疫苗及 DNA疫苗．脂质体复合物能在免疫接种后24h内迅速分布于全身，DNA疫苗能在 心脏，肺脏，肾脏，胸腺及注射部位肌肉内持续分布120d以上，通过滴鼻、点 眼免疫接种的DNA疫苗．脂质体复合物在分布的广度上优于DNA疫苗．未检测 到外源质粒DNA与鸡细胞染色体发生整合的现象，无疫苗引起的免疫毒性反应， 疫苗具有良好的安全性． 目前，直接运用本动物进行DNA疫苗分布和安全试验的报道较少，未见禽 传染性支气管炎DNA疫苗及DNA疫苗-脂质体复合物在鸡体内的分布及安全性 研究报道。 关键词：禽传染性支气管炎病毒；DNA疫苗；DNA疫苗-脂质体复合物；分布； 安全性；整合；毒性实验 V and studies Vaccineand Distribution OfIBVDNA safety DNA／Cationic LiposomeComplex BaiTian【PreventiveMedicine) Veterinary Di∞c列byPro￡Wang Honsmns Abstract Withthe ofDNA moreattentiontothe vaCCille，scientists