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ibv感染雏鸡噬细胞与抗体的相关免疫学变化
摘要 本实验应用快速、敏感、特异性强及重复性好的间接ELISA法成功的对雏鸡感染IBV 后第1天至第28天以及其对照组的血清、泪液、气管灌洗液和十二指肠灌洗液中特异性抗体 和总IgG含量进行检测;同时,根据巨噬细胞黏附能力强、贴壁快的特点,应用差速黏附法 纯化巨噬细胞,通过调整黏附培养时间长短和温度来控制巨噬细胞纯度,成功获得雏鸡骨髓 巨噬细胞和脾脏巨噬细胞,并应用中性红吞噬法、MTT法、酸性磷酸酶法、一氧化氮法以及 IL一1诱导法等多种方法进行巨噬细胞活性的检测。结果表明: 1.SPF雏鸡在感染IBV后,第3天就可检测到特异性抗体,在第14天达到高峰,并维 持数周;其中局部免疫(气管、副泪腺和肠黏膜)先于全身产生特异性免疫应答,丽非特异 性抗体水平低于健康对照组。说明患病鸡总体体液免疫降低,特异性体液免疫增强;而局部 体液免疫产生快而短暂,全身体液免疫产生较缓但持续时间较长。 健康对照组,其中脾脏巨噬细胞发生在第7—10天之间;骨髓巨噬细胞的活性则在第3—10天 和第7~2l天之间。表明IBV感染促使巨噬细胞活化,吞噬能力增强,胞内酸性磷酸酶含量 明显增加,分泌活性及抗原呈递能力增强,参与IBV感染的主要过程。与体液免疫变化基本 一致,但持续时间较特异性IgG长。 3.在IBV感染过程中,巨噬细胞IL-1产生增加,反映细胞免疫功能增强;机体IBV感 染后,巨噬细胞的作用显著,透过细胞因子网络、抗原呈递作用与其它免疫细胞发生联系, 增强SPF雏鸡的特异性免疫应答。 提示雏鸡感染IBV后机体体液免疫力有所降低,巨噬细胞参加IBV的免疫应答,在抵抗 传染性支气管炎病病毒中发挥了重要作用。探索了雏鸡感染IBV后机体特异性抗体产生变化 规律与巨噬细胞介导的非特异性免疫应答产生和变化的相关性。 关键词:鸡传染性支气管炎病毒;巨噬细胞{免疫球蛋白IgO,免疫学 V 东北农业大学农学硕十论文 The of about Immunology DynamicChanges and inSPFChickensInfectedwithInfectious Antibody Virus Bronchitis Abstract The succeedin and mselalm,tear, detectingantibodygeneralantibody experiment specific the and ofchickensIBV—infectedfrom to and control trachealDuodenal h-ngataon 1“day28“day is and indirectELISAwhich groupby fast,sensitive,beuerspecificity 011thebasisof adhesion and succeedin adherence,theexperiment s侄ong capabilityquick in
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