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h7亚型禽流感毒ha、ha1基因重组杆状病毒表达及其抗原性检测
摘要 禽流感(AvianInfluenza,A1)是由正黏病毒科A型流感病毒引起的传染性疾病综合症。 低致病力禽流感常引起呼吸道症状,产蛋量下降。高致病性禽流感。一旦暴发,将会给中国 乃至世界很多国家养禽业造成相当严重的经济损失.同H5亚型禽流感相比,H7亚型禽流感 的暴发同样会给养禽业造成巨大的损失。H7亚型禽流感病毒不仅能侵袭鸡鸭等家禽,还能 使笼养宠物鸟致病(如H7NI型),甚至能感染人类.AIV基因组为8节段负链RNA,共编 突的主要成分之一,血凝素(姒)是流感病毒的主要表面糖蛋白,HA具有产生中和抗体的 能力,可产生免疫保护作用,因此血凝素在禽流感的诊断和防制中起重要作用。 与杆状病毒共转染St9昆虫细胞,5d后获得重组病毒,命名为P】。将经过3轮蚀斑筛选纯化 的重组病毒接种s丹细胞大量繁殖后收获,PCR鉴定结果为完全纯化的病毒命名为P2。接种 结果表明其可与鸡抗H7亚型血清发生特异性抗原反应,而与H5和H9亚型鸡抗血清间无交 叉反应。血凝试验和间接免疫荧光试验证明了重组HA、HAl蛋白具有良好的生物学活性。 本试验利用昆虫一杆状病毒表达系统表达的重组H7亚型HA、HAl蛋白为可溶性的,带 有6个组氨酸标签,较易纯化。重组HA、HAl蛋白具有良好的抗原性。因此,杆状病毒高 效表达的重组HA、HAl蛋白在H7亚型禽流感病毒诊断及新型亚单位疫苗研究方面具有发 展前景。 关键词禽流感病毒;H7亚型;lIA基因;t[A1基因;重组杆状病毒 HAANDHAl OFAIVH7SUBTYPE EX.PRESSEDINRECOMBn寸ANT BACULOVIRUSAND OF DETECTION EXPRESSEDPRODUCTS Abstract Avianinfluenza(AI)iscausedbytypeA Avian influemwithlowvirulenceis characterized andlow symptom byrespiratory AIVonc49 cause economic production.neh咖lypathogenic outbreak,will severity damage fairly toChinaandeven worldwide outbreakofH7AlV countires.ContrasttoH5 many poultry AIV,the willalso to H7AIVnot makeincursionsintochicken、duck calJ∞great damagepoultry.The only butalso eveninfect encodes humans.11AIVwhich 10 pathopoiesiabirdn{7N1),and genome relatedtotheviralstructureandfunctionis proteins RNA.,and
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