gm-csf与瘟病毒e2基因共表达载体的构建及其诱导的免疫应答.pdf

摘 要 Fever Swine 猪瘟(Classical CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)弓l起的一种猪的高度接触 性烈性传染病，死亡率极高，给世界养猪业造成了巨大豹经济损失。我国已将猪瘟列 为一类动物疫病。60年代我国研制的猪瘟兔化弱毒疫苗在猪瘟病毒防治中起了决定 性作用，有效的控制了猪瘟在我国大规模的流行。但是近年来，猪瘟在各地仍不断有 散发和流行。传统疫苗可能已无法有效地控制该病。因此，发展安全、有效的新型疫 苗控制CSF变得非常的紧迫。佐剂是提高核酸疫苗免疫保护力的重要途径。本研究 对核酸疫苗poE2免疫保护力的影响。 l、GM．CSF与猪瘟病毒E2基因共表达载体的构建及其诱导的免疫应答：为探讨 粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM．CSF)对猪瘟病毒E2基因核酸疫苗小鼠免疫应 答诱导的影响。将CSFV 理盐水(E组)，每组lO只。0，2，4周于小鼠左后肢胫前肌进行肌注免疫，质粒量 为每只每次50腭。每次免疫前和末次免疫后2周尾静脉采血收集血清，ELISA检测 血清内特异性IgG水平。末次免疫后l周每组随机选3只无菌取脾，MIT法检测脾淋 巴细胞增殖情况。结果表明，与对照组比较，pcE2和peE2-GF3次免疫小鼠，IgG抗 体水平逐渐增高，淋巴细胞的转化率也明显增高，且pcE2-GF免疫组的kG抗体水平 和淋巴细胞的转化率均高于peE2免疫组。 2、GM-CSF与猪瘟病毒E2基因共表达载体的粘膜免疫：为探讨猪瘟核酸疫苗粘 膜免疫诱导免疫应答的情况，将50只雌性供试小鼠随机分为5组，即pcE2(A组)， 10只，于0、2、4周，各滴鼻免疫1次，共3次。免疫剂量为每只每次5％司本+1％ 甘油+50pgDNA质粒，免疫的总体积为209F只，次，生理盐水为每只每次20山。每 次免疫Iji『和末次免疫后2周尾静脉采血收集血清和小鼠新鲜粪便。ELISA检测血清内 组均可诱导全身免疫应答和粘膜免疫应答，加强免疫后的抗体水平逐渐升高，粪样中 的slgA也有明显的升高，且pcE2．GF共表达疫苗免疫组明显高于CSFVE2基因疫苗 免疫组。 E2 细胞因子GM-CSF可有效提高猪瘟病毒E2基因核酸疫苗的免疫应答。CSFV 诱导全身免疫应答和粘膜免疫应答，GM．CSF对CSFVE2基因疫苗的粘膜免疫有增 强作用。本研究为猪瘟基因工程疫苗的研究提供了新的思路。 关键词：猪瘟病毒E2基因；粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子；核酸疫苗；免疫应答； 粘膜免疫；小鼠 儿 Abstract Classicalswinefeveris viraldisease、柝tll and highlycontagious llighmortality economiclossesof isclassifiedasthe1stanimal causes swineworld-wide．It large diseaseinChina．Inthe1960s．Chinesevaccine crucialrolein sUain(C—strain)plays the CSFandarreststhe ofCSFin scale processofpreventionagainst prevalence large in recent CSF endemic China． China．However,in sporadic throughout