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a型及h5亚型流感病毒检测抗原的制备
摘要 捅要 Influenza 禽流感病毒(Avian Virus,AIV)是禽流行性感冒(简称禽流感,AvianInfluenza, AI)的病原。其中高致病性的HSNI亚型AIV可以造成鸡群的大批死亡,对家禽养殖业影响 严重,并可引起人的感染和死亡。AIV基因组为8节段负链RNA,共编码lO种与病毒结构 prate札M)具有 和功能关的蛋白质,其中核蛋白(Nucleoprotein,NP)和基质蛋白(Marx 之一。 通过Western Blotting证明了表达产物具有抗原性,且不与鸡、鸭的H7和H9亚型的抗血清 发生交叉反应。Dot-ELISA结果显示,表达的HAl可以在非变性条件下与相应抗体作用,表 性的分析表明:15个亚型中HAl氨基酸序列一致性为9.4%qO.2%,HA2氨基酸序列一致性 分子结构中所有抗原表位都位于HAl区域,因此初步认为利用HAl作为检测抗原比HA全 长更具有优势. 个组氨酸同Ni2+亲和层析技术得到纯化Ml。通过WesternBlotting证明表达产物具有抗原性, 得到纯化的NP,同样可以作为检测抗原来检测鸡和鸭的H5,H7、H9亚型AIV抗血清。 利用本试验表达的HAl、HA作为检测抗原,可应用于H5亚型AIV抗血清的检测,NP、 MI可以作为A型AIV抗血清的检测。同时“M1.鸭AIV抗血清.HRP标记兔抗鸭抗体”检 测鸭抗血清的方式在国内外尚未见报道,这将对鸭AIV血清学的检测和监测具有重要的意 义。 关键词:禽流感病毒;队;HAl;NP:M1;表达 The of A Detection AntigenPreparationType and HofAvianInfluenzaVirus Subtype Abstract Avianinfluenza the ofavian virus(AIv)ispathogen influenza(A1).ThehigIlly pathogenic infectedhuman madethem causethefowldead H5N1 and dead,can subtypeAIV,which beings andinfluencefowl AIV whichencodes10 the industry largely severely.Thegenome proteins relatedtothevim/structureandfunctionis of RNA.The oomIprisedeightnegative-strand thematrix the the protein(的aretype-specificantigens,and nucleoprotein刚P)and themain ofsurface haemagglutinin(HA)wasprotein spikes. this andHAl ofH5AIVwere ininsectcell In study,HA g蛐e
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