cpg-odn猪免疫增强作用的研究.pdfVIP

菜鞭农学院硪士学靛论文 攮要 CpG一0DN对猪免疫增强作用的研究 摘要 细菌B黻具有广鬻磅免疫裁激作蠲，有实验证明人工合成的epG—o睬可锻模弘细菌 子免疫学研究的热点之一。本研究将人工合成的三种cpG—oDN分别与猪瘟弱毒疫苗联合 免疫仔猪，结果表明三种cpG一0DN均具有免疫增强作用，筛选出免疫增强作用最好的一 赣epG一0嬲。对该磅序列进行传克痊扩增，并将该蘩缀壤粒分不同的裁慧与猪瘟弱毒 疫苗联合免痰仔猪，以确定重纽震粒锈免疫裁量与免蒗增强馋嗣闾酶关系。 1．人工合成三种以胞嘧啶鸟噤呤脱氧核苷酸为核心的cpG—ODN，并进行硫代修饰。 三种硫代修饰的cpG—ODN序列分别为ATCGATATcGAT 2．将三种cpG～ODN与猪瘟弱奄疫苗联合免疫仔猪，试验设对照组、疫苗组、疫苗与 ep￡固蹦合弼缎，通过露钵液免疫糖标《抗体效徐)以及细l包免疫摇标(赫鞭法测淋巴 细胞增殖能力、酯酶染色法确定T’拣巴细胞百分率、lb～2定量检溺法确定10～2砖分泌 量)的统计分析，综合评价三种不同CpG—ODN的免疫增强作用。猪体内试验表明三种 cpG—oDN序列均具有免疫增强作用，并筛选出在猪体内试验中免疫增强作用最好的一种 序，}】为ATCGATATCGAT。 载俸连接，转化天肠杼菌，逯过蘸巍斑初步筛选阳往餍粒，通过酶切鉴定爨缀质粒，并 测序。结果表明cpG—oDN成功插入到pMDl8一T载体上。 g／只、1200“g／只)与猪瘟弱毒瘦笛联合免疫仔猪。试验设疫苗纽、空载钵与疫苗舍用 纽，重组震觳与疫莓合嗣纽。结蕊表明，600瑟g／只剐蘩的重组痿粒与疫饕合竭纽致竞 疫增强作罔最强。 关键词：cDG一0DN；免疫佐剂；免疫应答；猪瘟弱赢瘦苗 菜鞠农学院硕士学谚论文 ImmuneE佰ectsof in CpG—oDNPigs ABSTRACT Bac捃南【lDKA has{mmun。s蛀mul器幻搿0f凳ctsa萎d列aptiveimmu黼持sp。玎sesi珏n¨me瓣璐speeies．ft hadbeen that mOtIfscouIdmimicbactcrialDNAtOjnducea Thl pr0VedsyntheticCpG·ODN potent immune werevaccjna把dwiththreekindsof andat【enuatedVaccineofCSFV respOnse．piglets CpGwODN thatthreekinds anhadimmunee妯ancementef话cts。0nekindoflhe The撺sul据sbowed of CpG_oDN waseh∞scdwhl。hh鑫d氇e孙s毫i嫩m疆n。髑hance哦e璀e狳cta皤elon醴{难o CpG—oDK p瓣转18-羊vee鼬， wereVaccinatedwiththerecombinantand址cenuatedvaccineofCSFVondifFerent Piglets plaSmids to relations the and ef诧c坞． connrmthe between immuneonhancement dosages dosages 1．Threekinds motifswhichcontain5 wem ofCpG·ODN