化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓的治疗作用及其对NotchNFκB信号通路的调控作用.pdf

一～～ 中文摘要 化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓的治疗作用 及对Notch／NF．KB信号通路的调控作用 摘 要 口腔扁平苔藓(omllichen planus，OLP)是一种发病机制不明的口腔黏 膜病，具有癌变倾向，WHO将其定义为癌前状态，目前临床上还没有一 种特效的治疗药物及方法。化湿行瘀清热方剂为许彦枝教授根据祖国传统 医学理论和多年临床经验研制的治疗0LP的经验方，经过近几年的临床 初步观察显示出良好的临床效果。但化湿行瘀清热方剂的确切作用机制是 什么?仍需要深入研究。在我们前期研究工作中应用基因芯片技术筛选出 有关OLP的142个差异表达基因及其8条相关通路，其中NF．KB通路与 OLP密切相关。近年来发现，Notch信号通路与一些人类肿瘤的发生发展 密切相关，许多研究证实，NF．KB与Notch转导通路之间存在复杂的交 什么?迄今尚未见报道。为此，本研究应用免疫组织化学技术，检测了 腑．KB信号传导系统在OLP发生、发展过程中可能的作用机制；采用酶 者血清、唾液中的表达，并通过观察0LP患者用药前后的临床病损变化 探讨了中药化湿行瘀清热方剂对OLP患者的影响及作用机制，为指导临 床用药奠定基础。 第一部分 床意义 平苔藓和正常口腔黏膜组织中的表达，并分析这三种蛋白间的相关性，探 讨Notch．1／NF．KB信号传导系统在口腔扁平苔藓发生、发展过程中的作 用。 中文摘要 口腔鳞状细胞癌、52例口腔扁平苔藓和30例正常口腔黏膜组织标本中的表 达情况，分析染色强度在这三种组织中的表达差异及三种蛋白表达的相关 性。 结果： 1免疫组化结果显示所检测的NF．KB蛋白在各组口腔黏膜组织中均 有表达，表现为细胞浆黄染。NF．KB在口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌组 P：O．000)，其在口腔扁平苔藓组中的表达稍低于口腔鳞状细胞癌组 (Z=．2．028，pO．022)。 2结果显示Notch．1蛋白在各组口腔黏膜组织中均有表达，表现为细 胞浆和细胞核黄染。Notch．1在口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌组中的表 其在口腔扁平苔藓组中的表达稍低于口腔鳞状细胞癌组(Z=．2．027， 肛O．021)。 3Jagged．1蛋白在各组口腔黏膜组织中均有表达，表现为细胞浆及细 胞膜黄染。Jagged．1在口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌组中的表达明显高 扁平苔藓组中的表达稍低于口腔鳞状细胞癌组(Z=．2．646，尸：O．004)。 (F0．443，pO．002)。 结论： 1 中的表达明显高于正常口腔黏膜组，具有显著差异。 2在口腔扁平苔藓组和口腔鳞状细胞癌组中NF．1(B、Notch．1、 异常激活可能与口腔扁平苔藓的发生发展有关。 中文摘要 关键词：口腔扁平苔藓；NF．1cB；Notch一1；Jagged—l 第二部分 化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓Notch／NF．KB信号通路 相关细胞因子的影响 目的：建立化湿行瘀清热方剂中薄层色谱(Thin—layerchromatography， TLC、)鉴别方法，控制制剂质量，并探讨其对口腔扁平苔藓(OLP)的影 响及作用机制。 方法：采用TLC对化湿行瘀清热方剂中的黄柏和赤芍进行定性鉴别， 采用酶联免疫吸附试验法检测30例口腔扁平苔藓患者治疗前后血清及唾 子l(sICAM．1)水平的变化，并观察评定其临床疗效。 结果：薄层色谱鉴别可检出样品中各相应的薄层斑点。患者经过8周 的治疗后，显效18例，有效lO例，无效2例，总有效率为93．3％，血清及唾 (氏O．05)。 结论： l薄层色谱法简便，准确，专属性强，可用于中药方剂的质量控制。 2化湿行瘀清热方剂治疗口腔扁平苔藓有明显的临床效果。 3经化湿行瘀清热方剂干预后与Notch．1脚．KB信号通路有关的细 胞因子明显降低，提示化湿行瘀清热方剂可能是通