RNA干扰HDAC1提高人宫颈癌HeLa细胞化疗敏感性研究.pdfVIP

·108 · 临床误诊误治 ２０ 15 年 1 月 第 28 卷 第 1 期 Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ ＆ Ｍｉｓｔｈｅｒａｐｙ熏 Ｖｏｌ．28熏 Ｎｏ．1熏 January ２０ 15 ·基础研究 · RNA干扰 HDAC1提高人宫颈癌 HeLa细胞化疗敏感性研究 孔祥玲,吴维光,佘　 野,葛红雨 　 　 [摘要]　 目的　 探讨体外应用RNA干扰技术抑制组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)表达,提高人宫颈癌HeLa细胞 对顺铂敏感性的作用及机制。 方法　 体外合成针对 HDAC1 的小干扰RNA(siRNA),脂质体法转染 HeLa细胞,将其 分为正常对照组(无干预措施)、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)及siRNA干扰组(转染 HDAC1基因siRNA)。 采 用Western blot法检测各组细胞HDAC1蛋白和乙酰化组蛋白H4(Ac-H4)的表达,采用聚合酶链反应(PCR)法检测 HDAC1基因和NF-κB基因mRNA表达。 HeLa细胞经不同浓度顺铂作用后,采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测对顺铂 的敏感性,以及采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。 结果　 与正常对照组及阴性对照组比较,siRNA干扰组HeLa细胞 HDAC1基因mRNA和蛋白表达均降低(P0．05或P 0．01),细胞内Ac-H4 表达增加(P 0．05),同时NF-κB基因 mRNA表达降低(P0．05)。 经不同浓度顺铂作用后,与正常对照组及阴性对照组比较,siRNA干扰组 HeLa细胞对 顺铂的50%抑制浓度降低(P0．05或P=0．01),细胞凋亡率增加(P0．01)。 结论　 HDAC1基因siRNA能够提高 宫颈癌HeLa细胞对顺铂的敏感性,增加组蛋白乙酰化水平、抑制HDAC1基因及NF-κB基因表达可能是其作用机制。 　 　 [关键词]　 宫颈肿瘤;组蛋白去乙酰化酶1;RNA干扰;化疗敏感性 [中国图书资料分类号]　 R656.9　 　 [文献标志码]　 A　 　 [文章编号]　 1002-3429(2015)01-0108-05 [DOI]　 10.3969/ j.issn.1002-3429.2014.01.040 A Sensitivity Study of HDAC1RNA to Enhance Chemosensitivity in Human Cervical Carcinoma Cell Line HeLa 1 1 2 2 KONG Xiang-ling ,WUWei-guang ,SHEYe ,GEHong-yu ( 1. Departmentof ObstetricsandGynecology,AffiliatedHos- pital,Logistical College of the Chinese Peoples Armed Police Force,Tianjin300162,China;2. Maternity and Child Health Institute of Beichen District,Tianjin300400,China) [Abstract]　 Objective　 To observe histone deacetylase 1 (HDAC1)expressioninhibitedby siRNAinvitroonchemo- sensitivity to cisplatin in human cervical carcinoma cell line HeLa,and to investigate the possible mechanisms. Methods　 The siRNA targeting HDAC1 was generated in vitro, and transfected into human cervical carcinoma HeLa cell by lipo- fectamine. The HeLa cellswere divided into normal control group (no intervention),negative control group (transfectedwith negative control siRNA),and siRNA group (transfectedwith HDAC1siRNA). Western blot was used to detect the HDAC1 protein and ac