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乳制品中卡拉胶海藻多糖硫酸酯化技术研究 龚 方 中国海洋大学 刘宗利 王乃强 刘海玉 杨海军 保龄宝生物股份有限公司 摘要：利用微波辐射法制备特定分子量多糖(MW1000～20000Da)并进行硫酸酯化修饰，从而提高其生物活性 或降低毒副作用。优化后的卡拉胶酸解条件为：溶液浓度5％，制备量600mL，pH2.0,微波功率750W。当目标产 物分子量为1000～3000Da时，最适微波处理时间为30min；当为5000～8000Da，最适处理时间为20min； 10000～12000Da时，最适处理时间为12min。考察酯化反应温度、酯化剂浓度等对硫酸根取代度的影响，确定较 优反应条件，得到特定分子量及硫酸根取代度的卡拉胶多糖。本项研究为进一步针对卡拉胶多糖的抗流感病毒活性 研究奠定了基础。 关键词：卡拉胶海藻多糖;微波辐射法；硫酸酯化 将浓缩后的物料进行喷雾干燥。操作参数分别 为：热空气进口温度170--180℃，出口温度80 95℃，喷头压力2k∥cm2。 1．2．3分子量测定 采用高效凝胶色谱法测定多糖分子量。色谱柱 lnlnx G5000 30 为TSK—GELPWXL(7．8cm)，流 动相为0．07％Na2S04溶液、0．4mL／min，柱温 Standard270 50℃。标准多糖为Dextran 000、 80 000和DextranBlue 000、12000、5000、l 1 000 000。将各标准多糖配成浓度为10mg／mL的 标准液，各取25IJ L分别进样，得到各自的出峰时 间，并计算各标准样分子量的对数值，绘制标准曲 线。配制样品溶液，进样，测定出峰时间，查标准 曲线．可知样品的分子量分布。 2结果与分析 2．1微渡辐射法制备特定分子量卡拉胶多糖条件的 确定 利用微波炉制备特定分子量的卡拉胶。具有速 度快、操作简便、能耗低等优点。采用微波炉制备 时，影响终产物的主要因素包括：①料液pH值； ②处理时间；③料液浓度；④料液体积；⑤功率。 2．1．1料液浓度、体积和工作功率的确定 选择料液体积为600mid次，料液浓度小于 5％时．料液浓度对微波处理效果的影响不大 (图l、图2)，而过高的浓度引起降解不均匀，产生 W处理时的料液浓度 大量沉淀物。故确定微波750 为5％。 2．1．2pH值与时间对处理效果的影响 设定处理时间10、12、23、30min四个水平， 设定处理pH值2．5、2．0、1．5三个水平；同时测定 圈3 1．5微波处理28 5％多糖，600mL．pH min的产物分布 000的产物所占 分子量1000、l000--20000、20 峰面积．用以评价降解条件是否合适。结果如表2 值2．0条件进行酸降解，产物分布符合要求。 rain、12 及图3、图4所示。 在pH值2．0条件下，取时间10 min、 23 以上结果表明，pH值对水解程度的影响十分显 rain、30rain制备卡拉胶．产物分子量分布情况 见表3。 著。在制备l000以上分子量的卡拉胶时。pH值 1．5的条件太过剧烈。卡拉胶水解过度；pH值2．5 利用微波辐射酸解法制备特定分子量 000一-20000 时水解程度很低。卡托胶处于凝同态。所以采用pH (1 Da)卡拉胶多糖的条件为：料液浓