运用石蜡切片进行脂肪染色的探讨.pdfVIP

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201 1年全国病理技术新进展研讨会论文汇编 动的旺盛期有关,也与能否熟练掌握酶组织化学染色技术有关。 甲苯胺兰法是染料经渗透作用进入组织,它虽可同时使成骨细胞和破骨细胞着色,但由 于胞浆和胞核都染为蓝色,反差不大,视觉效果不如酶组织化学法好。 应用免疫组化SP法OPG是成骨细胞表面的蛋白成分,经免疫组化染色显示阳性结果, 即胞浆为棕色,胞核为蓝色;RANK是破骨细胞表面的蛋白成分,免疫组化染色无表达,可 能与抗体质量和组织酸化有关。 本文讨论的是关于成骨细胞、破骨细胞的三种染色方法的比较问题。我们认为酶组织化 学方法以其极富个性的亮丽色彩更加清晰地反映出成骨细胞、破骨细胞的形态结构和酶含量 的多少,因而是首选方法之一。免疫组化法在本研究中受到的影响因素较多,如破骨细胞 (RANK)经多次染色均为阴性,思考(1)鼻窦筛骨骨性结构经酸脱钙后,对组织中抗原 抗体的特异结合有什么样的影响?(2)抗体质量是否存在问题?对这些问题,我们将在后 续的研究中继续摸索,不断使成骨细胞、破骨细胞的染色方法逐渐成熟起来。 25.粘液卡红染色的体会 张淑英刘嫒嫒 中国医学科学院北京协和医院病理科 在特殊染色方法中,粘卡染色过程操作简单,看起来很容易掌握,但在实际工作中却 会遇到很多问题,我们很难保证每次都配出高质量的粘卡原液。如果能独立熟练的从染液 的配置到染出一张水平好的切片,还需要一定的经验。 我们多年以来采用Southgate氏粘胭脂法: l染液配置:将胭脂红lg、氢氧化铝lg、50%酒精100ml混合,摇动使其充分溶解,再加 氯化铝0.59,放在电磁炉上水浴煮沸2.5~3min,冷却,冰箱保存。使用前需过滤,粘卡原 液与蒸馏水以l:4稀释。 2染色方法:石蜡切片厚4.51an,脱蜡至水一苏木素染液2min一水洗一分化一水洗一返蓝 一水洗—粘卡染液lh-脱水、透明、封片。 3结果:粘液一红色;胞核一蓝色。 4体会s ①电磁炉选用低挡加热,这样升温快,沸点明显,时间准确;为了防止温度高,粘卡染液 外溢,可在装有染液的瓶口用卫生纸和皮筋系好。 ②配好的粘卡原液有些稠,所以在使用时要提前过滤。 ⑨根据不同组织来掌握染色时间,一般强阳性组织,用新配的染液在室温条件下染色lh就 很红,稀释后的染液可重复使用,但随着染色次数的增多,染色时间要适当延长。 ④染色时最好加染阳性对照片。 26.运用石蜡切片进行脂肪染色的探讨 庞建欣 卫生部北京医院病理科 目前在进行脂肪染色时多运用冷冻切片,而在回顾性研究过程中需要脂肪染色时在寻求 冷冻切片是不太可能了,只能应用石蜡切片,而石蜡切片在组织脱水透明过程中,已丢失了 48 2011年全国病理技术新进展研讨会论文汇编 很多的脂肪颗粒。特别是脂肪颗粒较少时,在经过二甲苯脱蜡,此时脂肪颗粒就已基本上全 部丢失,在进行脂肪染色时也就基本上找不到脂肪颗粒了。针对这个问题,我对石蜡切片的 脂肪染色进行了多个条件的摸索、探讨。 标本来源 选取乳腺组织中含有脂肪颗粒的蜡块四个,在四种条件下处理后进行油红O染色观察 脂肪染色的情况。 方法:选取四种条件: l、经烤片二十分钟后,进行二甲苯脱蜡处理,经梯度酒精入水,再进行油红O染色。 2、经烤片二十分钟后,将切片直接进入70℃水中,热浴脱蜡十分钟,不经二甲苯处理, 直接进行油红O染色。 3、经烤片二十分钟后,将切片直接放入70℃的水中,热浴脱蜡二十分钟,其间换水2 次(70℃),不经二甲苯处理,进行油红。染色。 4、经烤片二十分钟后,将切片直接放入70℃的水中,热浴脱蜡四十分钟,其间换水4 次(70℃),不经二甲苯处理,进行油红。染色。 操作方法 l、72℃烤箱中烤片20分钟。 2、将切片放入事先准备好的80℃以上的蒸馏水中洗一分钟。 3、再更换两次以上热水,各5~10分钟。 4、

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