枯草芽孢杆菌B215生物学特性及对香蕉枯萎病的生防效果评价.pdfVIP

第 31卷 第 8期 热 带 作 物 学 报 Vo1．31 No．8 2010年 8月 CHINESE JOURNAL OFTROPICAL CROPS Aug．2010 枯草芽孢杆菌B215生物学特性及对 香蕉枯萎病的生防效果评价 殷晓敏 ，郑服丛 。，-，贺春萍 。，马蔚红 ，曾会才 一，王家保 。，徐碧玉 ，金志强 ， 1中国热带农业科学院海口实验站 ．海南海 口 571101 2中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海南海口 571101 3中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 ，海南儋州 571737 4海南大学环境与植物保护学院．海南儋州 571737 摘要 在室内测定菌株 B215对香蕉枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发都有 良好抑制效果的基础上 。优化拮抗菌株 的 最佳培养条件为 ：在 NA培养基上 ，装液量为 50mL／500mL，最适初始 pH值为 7．0～7．5，初始接菌量为 l％，培 养温度为 28℃．以便更好地应用于 田间试验。以此培养条件为依据 ，开展拮抗菌株 的盆栽小苗实验 ，选用正交 试验 L螭(2，)设计 ，得出菌株 B215对香蕉枯萎病菌的最佳防效组合为 ：在小苗定植前 ，用活菌培养液 750mL株／ 浸根 ．可以降低小区香蕉枯萎病发病率 。进一步试验验证结果显示 ：盆栽试验 B215对 Foe的防效为 62．95％。 关键词 枯草芽孢杆菌 ：香蕉枯萎病 ：生防效果 doi 10．3969~．issn．1000—2561．2010．08．033 中图分类号 S432．4 香蕉枯萎病 (FusariMmoxysporumf．sp．cbe e，Foc)是香蕉的毁灭性病害[1-21，化学药剂是植物病害防 治最直接 、有效、便捷 的方法 ，但 由于香蕉枯萎病是土传维管束病害 ，病原菌从根 、茎基部侵入后在维 管束中侵染蔓延 ．一般化学药剂难以凑效 ．而香蕉抗枯萎病育种难度大 ，周期长 ，通过生物防治植物土 传病害 ，是尽快解决这一难题的方法之一 。 笔者在香蕉枯萎病病重园区，从生长正常的香蕉假茎内分离获得一株细菌 B215。菌株 B215培养滤 液处理病菌孢子后 ，显微观察表现为：病菌孢子膨大成球状或串珠状，内含物外泄，细胞崩溃干瘪，致 使病菌丧失侵染和繁殖能力。并将 B215鉴定为枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)[31。本研究拟在前期开展工 作基础上 ．进一步开展拮抗菌株生物学特性 的测定及其对香蕉枯萎病盆栽防治试验 的研究．可望筛选 出 对大 田香蕉枯萎病菌具高抑菌活性的拮抗菌株 ．从而为保障香蕉产业 的健康发展 ，增加蕉农 的收入做 出 贡献 1 材料与方法 1．1 B215生物学特性测定 1．1．1 菌体生物量的测定 用 755B型紫外可见分光光度计 ．在波长 600nm处 ．测定发酵液的吸光度 ∞ 值 ，以未接菌株的NB培养液作对照。 1．1．2 菌株生长曲线的测定 取 500IxLB215种子培养液分别接种于 50mLNB培养液 250mL三角瓶 中，28oC，180r／min条件下振荡培养 ，分别在 16、2O、24、28、36、40、44、48、60、72、84h取样 ， 测DD鲫值。 基金项 目：中央级公益性科研院所基本科研业务专项项 目(No．2009hzs1J026，ITBBKF2008—2)，海南省 自然科学基金项 目(No．309044)资助 。 第一作者简介 ：殷晓敏 ．女 ，研究实习员。研究方 向：植物病害生物防治及寄主与病原物的互作。E—mail：yinxm8303@126．corn。 {通讯作者，金志强，E—mail：zhiqiangjin2001@yahoo．tom．an。 收稿 日期 ：2010—07—01 修 回日期 ：2010—08—31 8期 殷晓敏等 ：枯草芽孢杆菌 B215生物学特性及对香蕉枯萎病 的生防效果评价 1．1．3 菌株最适培养温度的筛选 B215种子培养液分别接种于NB培养液 ．分别置于 15、20、25、28、 30、33、35、38、4O、45、5OcI=共 11个温度梯度下 180r／min振荡培养 48