内毒素活化和耐受的巨噬细胞差异表达基因分析.pdfVIP

维普资讯 · 1362 · ：2004年 l1月第21卷第 11~] ChinJExpSurg,November2004,Vol21,No．11 · 实 验 研 究 · 内毒素活化和耐受的巨噬细胞 差异表达基因分析 李崇辉 刘巨超 张爱群 陈明易 臧传波 徐迎新 黄志强 【摘要】 目的 分析内毒素活化的和内毒素耐受的巨噬细胞差异表达基因，以探讨内毒素耐 受的分子机制。方法 分离小鼠腹腔巨噬细胞，活化组直接以1mg／L脂多糖处理2h，耐受组先以 脂多糖预处理20h，再以脂多糖处理 2h。利用含 1176个基因的小鼠cDNA表达芯片进行基因表 达谱分析。结果 活化组与耐受组间的3倍差异表达基因为31个，其中耐受组有8个基因的表达 水平明显高于活化组，包括细胞表面抗原FcgammaRIIb、间隙连接蛋 白43、凋亡相关蛋 白NIP3、iN— OS、骨髓 间充质细胞抗原(BST)一1以及激活素和卵泡抑素等，有 23个基因的表达水平明显低于活 化组，包括转录因子EPAS1、EGR2、IRF1，细胞周期素依赖性蛋白激酶 p21和 p57，骨桥蛋 白，尿激 酶型纤溶酶原激活物及其受体，以及多种生长因子受体和细胞因子。结论 这些差异表达基因多 数未曾报道与内毒素耐受相关，可能在内毒素的发生中具有重要作用，并成为内毒素耐受的新的标 志分子，对其进行干预有可能模拟内毒素耐受的保护效应。 【关键词】 脂多糖； 巨噬细胞； 内毒素； 基因表达 Analysisofthedifferentialgeneexpression in endotoxin activated andendotoxin tolerantmacrophages LIChong-hui，LJUJ“chao，ZHANGAi—qun，eta1．InstituteofHepatobiliarySurgery，Instituteof GeneralSurgicalResearch，PLA GeneralHospital，Beijing100853，China A【bstract】 0bjective Inordertoexplorethemolecularmechanismofendotoxintolerance，the differentialgeneexpressioninlipopolysaccharide(LPS)activatedandLPStolerantmufinepefitone~ macrophageswasexamined．Methods Murinepefitone~ macrophageswereisolated．Activatinggroup wasstimulatedwith1mg／LLPSfor2h；TolerantgroupwasfirstpretreatedwithLPSfor20h，then rechallengedwithLPSfor2h．cDNA arrayscontaining1176mRNAspecieswereusedtOdeterm inetheir expressionprofiles．Results ThirtyoneOUtof1176geneswerefoundtOdifferbymorethan3一foldbe— tweentheLPSactivatedandtolerantgroups．Amongthem theexpre~ion1evelsof8genes werehigherin LPStolerantgroupthanin LPSactivatedgroup，includingcellsurfaceantigenFcgammaRIIb，connexin 43，apoptosisassociatedproteinsNIP3，iN0S，bonemarrow stromalcellantigen1(BSr1)，activinand foflistatin．Theexpression1evelsoftheremaining23geneswere1owerinLPStolerantgroupthaninLPS activatedgroup．Thesegenesinc