胶体金免疫层析法和荧光定量PCR联合检测沙门氏菌.pptxVIP

2025/07/10胶体金免疫层析法和荧光定量PCR联合检测沙门氏菌汇报人：_1751851681

CONTENTS目录01胶体金免疫层析法原理02荧光定量PCR技术原理03联合检测的优势04沙门氏菌检测应用

胶体金免疫层析法原理01

基本概念胶体金的定义胶体金是由金盐在还原剂作用下形成的纳米级金颗粒，具有独特的光学性质。免疫层析技术免疫层析技术是一种快速检测技术，利用抗原抗体特异性结合原理进行定性或定量分析。层析过程中的信号放大在层析过程中，胶体金颗粒作为标记物，通过聚集产生肉眼可见的信号，实现信号放大。

检测原理抗原抗体特异性结合胶体金标记抗体与沙门氏菌抗原特异性结合，形成肉眼可见的红色条带。层析过程中的信号放大样品中的目标抗原与标记抗体结合后，通过层析作用在试纸上移动并放大信号。试纸条上的检测区域试纸条上设有检测区和对照区，用于观察胶体金标记抗体的聚集情况。颜色变化的判定标准根据试纸条上检测区的颜色变化，判断沙门氏菌的存在与否。

操作步骤样品制备将待测样品与缓冲液混合，通过离心等步骤提取出目标抗原，为检测做准备。层析反应将处理好的样品滴加到试纸条上，胶体金标记的抗体与样品中的抗原结合，形成可视化的线条。结果判定根据试纸条上出现的线条颜色深浅或位置，判定沙门氏菌的存在与否及其浓度。

荧光定量PCR技术原理02

基本概念DNA扩增过程荧光定量PCR通过循环温度变化实现DNA的指数级扩增。荧光标记探针使用特异性荧光标记探针，实时监测扩增过程中的DNA量。定量分析基础通过标准曲线对比，实现对目标DNA片段的定量分析。PCR反应的特异性设计特异性引物和探针，确保PCR反应的特异性，避免非特异性扩增。

检测原理01荧光信号的产生荧光定量PCR通过特定的荧光染料或探针，在DNA扩增过程中产生与扩增产物量成正比的荧光信号。02定量分析的实现利用荧光信号强度与DNA模板浓度之间的关系，通过标准曲线对未知样品中的沙门氏菌进行定量分析。

操作步骤荧光信号的产生荧光定量PCR中，特异性荧光探针与目标DNA序列结合，产生可检测的荧光信号。扩增与定量通过实时监测荧光信号强度，可以追踪PCR反应中目标DNA的扩增过程，并进行定量分析。

联合检测的优势03

提高检测灵敏度胶体金的定义胶体金是由金盐在还原剂作用下形成的纳米级金颗粒，具有独特的光学性质。免疫层析技术免疫层析技术是一种快速检测技术，通过抗原抗体特异性结合实现目标物的定性或定量分析。标记物的作用在胶体金免疫层析法中，胶体金作为标记物，通过颜色变化指示检测结果，实现可视化分析。

提高检测准确性DNA的扩增过程荧光定量PCR通过特定的引物和酶，实现目标DNA片段的指数级扩增。荧光信号的检测在PCR循环中，荧光标记的探针与扩增产物结合，通过荧光信号强度来监测反应进程。定量分析的原理利用已知浓度的标准品建立标准曲线，通过比较样品的Ct值来定量分析目标DNA含量。PCR反应的特异性设计特异性引物和探针，确保PCR反应只扩增目标序列，提高检测的准确性。

操作简便性样品处理将待测样品与缓冲液混合，进行稀释或提取，以适应检测要求。层析反应将处理后的样品滴加到试纸条上，胶体金标记的抗体与样品中的沙门氏菌特异性结合。结果判定通过观察试纸条上的显色条带，根据颜色深浅或有无判断沙门氏菌的存在与否。

沙门氏菌检测应用04

检测方法的选择抗原抗体特异性结合胶体金标记抗体与沙门氏菌抗原特异性结合，形成肉眼可见的红色条带。层析过程中的信号放大待测样本通过层析膜时，胶体金标记的抗体与抗原结合，信号在膜上放大。胶体金颗粒的聚集现象当抗体与抗原结合后，胶体金颗粒聚集，导致颜色变化，从而实现检测。检测结果的直观性胶体金免疫层析法通过颜色变化直观显示检测结果，无需复杂仪器。

联合检测的实施荧光信号的产生荧光定量PCR通过特定的荧光染料或探针，在DNA扩增过程中产生与扩增产物成比例的荧光信号。定量分析的实现利用荧光信号强度与DNA模板浓度之间的关系，通过标准曲线对未知样品中的目标DNA进行定量分析。

检测结果的分析胶体金的定义胶体金是由金盐在还原剂作用下形成的纳米级金颗粒，具有独特的光学性质。免疫层析技术免疫层析技术是一种快速检测技术，利用抗原抗体特异性结合原理进行定性或定量分析。标记物的作用在胶体金免疫层析中，胶体金作为标记物，通过颜色变化指示检测结果，实现快速可视化。

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