细胞培养设施和基本条件.pptVIP

第1页，共34页，星期日，2025年，2月5日准备室：用于进行培养器皿的清洗、包装、培养物质的准备和消毒以及供应物品的保藏等。缓冲室：为减少外界污染源带入培养室，在培养室外间有一缓冲室，3～5m2既可，可作为更衣室,也可放置恒温培养箱或离心机。培养室：用于进行细胞培养和各种无菌操作的实验室。其基本条件是：清洁、无菌、干燥、不通风，并具有适宜的光线，应尽量设法避免外界的污染。培养室和缓冲室的天花板上均应装消毒用的紫外线灯。第2页，共34页，星期日，2025年，2月5日41缓冲室第3页，共34页，星期日，2025年，2月5日第4页，共34页，星期日，2025年，2月5日第5页，共34页，星期日，2025年，2月5日一、最常用的大型必备装置和仪器净化工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、离心机、冰箱、电热干燥箱、超纯水装置、消毒锅、超声波清洗器、恒温水浴箱、冷冻保存装置、天平等二、最常用的培养器具l.过滤除菌装置：不锈钢正压过滤器、一次性滤器2.手术器械3.培养器皿：溶液瓶、培养瓶、培养皿、多孔培养板、移液管和吸管、离心管第二节实验室设备第6页，共34页，星期日，2025年，2月5日外流式（基本不用）侧流式直流式超净工作台：工作原理是利用鼓风机驱动空气遁过高效滤器除去空气中的尘埃颗粒，使空气得到净化。净化空气徐徐通过工作台面，使工作台内构成无菌环境。第7页，共34页，星期日，2025年，2月5日超净工作台结构和模式图第8页，共34页，星期日，2025年，2月5日CO2培养箱：维持适当温度、湿度与pH培养箱设定的条件为37℃，5％CO2培养容器需与外界保持通气状态箱内空气应保持干净，定期消毒（紫外灯、酒精）水槽:使用蒸馏水，保持一定湿度。第9页，共34页，星期日，2025年，2月5日电热干燥箱：烘干和干热消毒玻璃器皿鼓风与升温同时进行，100度时可停止鼓风禁止先升温后鼓风100度以下时再打开箱门金属器械、塑料制品、橡胶等不能在干燥箱内消毒干热灭菌（160℃，2hr）第10页，共34页，星期日，2025年，2月5日高压灭菌锅：用于湿热灭菌液体、金属器械、塑料制品、橡胶等不能在干燥箱内消毒121℃，20min第11页，共34页，星期日，2025年，2月5日超纯水仪倒置显微镜离心机液氮罐第12页，共34页，星期日，2025年，2月5日手动移液器电动移液器第13页，共34页，星期日，2025年，2月5日精密PH计微孔板震荡器第14页，共34页，星期日，2025年，2月5日培养器皿玻璃瓶皿（用于储存各种液体）玻璃瓶（500毫升、250毫升、100毫升）吸管、离心管多孔培养板4、6、24、96孔；培养皿30、60、100毫米；培养瓶第15页，共34页，星期日，2025年，2月5日第三节清洗与消毒在组织细胞培养中清洗和消毒是一项极为重要的环节。清洗的主要目的:清除杂质和微生物，使在器皿内不残留任何影响细胞生长的成份。细胞培养所用的器皿：玻璃类塑料类金属类

第16页，共34页，星期日，2025年，2月5日一、清洗在细胞培养中，体外细胞对任何有害物质都非常敏感,均能影响培养细胞的生长微生物产品附带杂物上次细胞残留物非营养成分的化学物质需要清洗的培养用品玻璃器皿的清洗胶塞的清洗塑料制品的清洗第17页，共34页，星期日，2025年，2月5日1.玻璃器皿的清洗浸泡刷洗(+烘干)浸酸冲洗清洗后的玻璃器皿：干净透明无油迹第18页，共34页，星期日，2025年，2月5日浸泡：初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡，以使附着物（灰尘或其他有害物）软化或被溶掉。先用自来水简单刷洗，然后用5％稀盐酸液浸泡过夜，以中和其中的碱性物质。再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的残留蛋白质，干固后不易洗掉，用后立即浸入水中，要求完全浸入，不能留有气泡或浮在液面上。刷洗：用毛刷沾洗涤剂刷洗，以除去器皿表面附着较牢的杂质，刷洗要适度，过度会损害器皿表面光泽度。自然晾干或烘干后泡酸。第19页，共34页，星期日，2025年，2月5日浸酸：玻璃器皿浸泡到清洁液（洗液）中清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用，而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质浸泡时器皿要充满清洁液，勿留气泡或器皿露出清洁液面浸泡时间：一般为过夜，不应少于6小时第20页，共34页，星期