质粒拷贝数计算.docxVIP

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质粒拷贝数计算 1A260吸光度值=dsDNA50ug/ml=ssDNA33ug/ml=ssRNA40ug/ml 核酸浓度=(OD260)x(dilutionfactor)x[33或40或50]=ng/ul MW代表克/摩尔,单位dolton:1dolton即表示1g/mol 1摩尔=6.02x10(23)次摩尔分子(拷贝数) 均匀分子量(MW): dsDNA=(碱基数)x(660道尔顿/碱基) ssDNA=(碱基数)x(330道尔顿/碱基) ssRNA=(碱基数)x(340道尔顿/碱基) 获得拷贝数计算公式: (6.02x10(23)次拷贝数/摩尔)x(浓度)/(MWg/mol)=copies/ml. 即: (6.02x10(23))x(g/ml)/(DNAlengthx660)=copies/ml. 或 (6.02x10(23))x(ng/ulx10(-9))/(DNAlengthx660)=copies/ul. 例: 3000碱基质粒,浓度100ng/ul, MW=3000bpx660dalton/bp=1.98x10(6)daltons,即1mol=1.98x10(6)g。 [100ngx10(-9)]g/1.98x10(6)=摩尔数 copy数=摩尔数x6.02x10(23)=3x10(10)copies/ul.

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