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生物资源中生 。物活性物质的 开发与利用;1.1概发 主要内< 、应用生物技术的必要性 、生物技术研究的主要内畚及优越性;一、应用生物技术的必要性;Q二,生物技术研究的主要内/及 优越性;2、优越性:;槌希材的兮6鉴定;一、赖物書的会6堂物岩察定;歩8吱物修技术在彳草書要 定彳衿旅用;(1)随机扩增多态DNA技术(randomly amplified polymorphic DNAZRAPD) ?多态性:就是多种表现形式 ◎ DNA的多态性:指一个生物群体中,DNA分子或基因的某些 位点可以发生屮性改变,使DNA的一级结构各不相同,但不影 响基因的表达,形成多态。多态可以看作是在分子水平上的个 体区别的遗传标志。 ?RAPD:用随机合成或任意选定的单一引物在低温条件下与模 板DNA序列随机的配对实现扩增,获得DNA指纹图谱,对研究 对象的基因组DNA作多态性分析。 ?RAPD在药材鉴定中的具体应用就是:先找出真品特定的DNA 片段,对此测序并制备DNA探针来检测相应药材;(2)限制性片段长度多态性分析技术;3;(4)微卫星DNA技术(sequence-tagged microsatellites简称 STM);(5)单核単酸多态性技术(single nucleotide polymorphism, 简称SNP);(6) DNA直接测序技术(DNA sequencing) 即对核酸DNA分子~级结构的确定。 这种技术的应用使中药的鉴定技术取得了 突破性的进展。;、动物药的分子鉴定;2、DNA分子标记技术;ZM史物活權物殖的基?工程 車要甫客;3;、諾用植物基国席能建史;二、史物兹木5咨用植物优良品种的育;a病虫害的防治;3、利用基因工程技术研制转基因动物和植物, 可以定向生户重耍■的生妆活性成分并能创制和 改造天然活性成分,使转基因的动、植物成为 生产中药活性成分的活体工厂。;三,药用植物关键酶基因与代谢途径;2、次生代谢途径关链酶基;L4史妆治被牧质的轴胞工巷;动物细胞焙春在药物开发中;主要应用于药物的筛选,有三种模型:;1细胞分子水平模型的特点 0 A.与整体水平、赛官组织水平模型相此,细胞糸的生 物学特征较为一致,可用于昵索药物对细胞形态及生 理特征的影响,从而判断药物疗效及其毒性。 ?B.材料用量少,药物作用机制比较明确,可以实现大 规模筛选,编短新药筛选周期。 ?C.为应用仓动化操作箕定基础,使药物筛选由传统手 工筛选形式转变为由计算机控制的有动化大规模筛选 的新技术体糸,形成了高通量药物筛选模型(high throughput, screening,HTSJ;2细胞分子水平模型的优势 O A.大样本量的筛选,使药物筛选工作在尽可能大的对象和站围 内进行,这样更家易寻找到嵩质量的药物。 ? B.实现了一药多筛,使经化学合成或天然产物提取制得的一个新 分孑能在多个药效模型上得到筛选,从本质上扩大了新药分子的 搜寻危围和是次,也有助于从老药中发现新用途。 3细胞分子水平筛选模型的缺点 0 A.由于体内、体外的环境不一样,药物的作用结果也不一样,在 体内存在着许多因素可能对药物进行修饰从而导致药物作用的增 强或减弱,如由无致痉性转变为具有玫建性,所以在细胞培养条 件所得的结果可能不一定完全适用于体内的各种条件。 ? B.药物对细胞的作用可以有多种表现,但由于检测手段和检测方 成的F艮制,可供药物翁选的指标有F艮,所以在进行测就財应尽量 取多种细胞类型,扩大检浏竈国。;命植物细胞的全能性:即单个细胞在适宜的环境 下可分化发育成植株,并具有整株楂妆所具有 的合成化合物的能力。 1植株再生(有学丿 2植物有效成分的生产 ? 有效成--次生代谢产物 ? 次生代谢产物指细胞生命活动或植物生长发 育正常运行的非必需的小分子化合物,其产生 和分布通常有种属、繇官、组织及生长发育时 期的特异性;CU生物工程技术进行药用植物有效成分生产的方盛 ?a?液体悬浮焙养:细胞悬浮于焙养基中生长菊维持, 通过震荡或转动装置使细胞始终处于分散巷浮于培系 液内的培养方法。深度超过5mm,需耍搅动培养基, 起.过10cm,还需要深层通入CO2和空气,以保证足够 的气体交换。该方漆主要用于生产细胞内的有效成分, 比如对紫杉醇和紫苹亨色素的生产。 ? b.固定化细胞培器:固定化细胞技术,就是将具有一 定生理功能的生物细胞,例如微生物细胞,独物细胞 或动物细胞等,用一定的方法将其固定[包埋漆或吸 附成丿作为固体生物催化剂而加以利用的一门技术。;壽C.发酵工程技术:是指采用现代工程技 术手段,利用微生物的禁些特定功能, 为人类生产有用的户品,或直接把微生 物应用于工业生产过程的一种新?技术, 是用来解决按发酵工艺进行工业化生产 的工程学问题的学科。 如中国药科大学对
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