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饮食纤维含量测定方法 饮食纤维含量测定方法 PAGE / NUMPAGES 饮食纤维含量测定方法 可编写可改正 酶- 重量法 原理： 样品分别用 α - 淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。 总饮食纤维（ TDF）是先酶解，而后用乙醇积淀，再将积淀物过滤，将 TDF残渣用乙醇和丙 酮冲刷，干燥称重。不溶性和可溶性饮食纤维（ IDF 和 SDF）是酶解后将 IDF 过滤，过滤后 的残渣用热水冲刷，经干燥后称重。 SDF是将上述滤出液用 4 倍量的 95%乙醇积淀，而后再 过滤，干燥，称重。 TDF、IDF 和 SDF量经过蛋白质、灰分含量进行校订。 合用范围 本方法合用于各种植物性食品和保健食品。 仪器 烧杯： 400 或 600ml 高脚型。 过 滤 用 坩 埚 ： 玻 料 滤 板 ， 美 国 试 验 和 材 料 学 会 （ ASTM） 40- 60μm， Pyrex 60ml （Corning buchner ，或同样的） 。以下办理： 1） 在灰化炉 525℃灰化留宿。炉温降至 130℃以下拿出坩埚。 2） 用真空装置移出硅藻土和灰质。 3） 室温下用 2%冲洗溶液浸泡 1 小时。 （4） 用水和去离子水冲刷坩埚；而后用 15ml 丙酮冲刷而后风干。 5） 在干燥的坩埚中加硅藻土，在130℃烘干恒重。 6） 在干燥器中冷却 1 小时，记录坩埚加硅藻土重量，精准至。真空装置： 1） 真空泵或抽气机作为控制装置。 2） 1L 的厚壁抽滤瓶。 3） 与抽滤瓶相当套的橡皮圈。 振荡水浴箱： 1） 自动控温使温度能保持在 98±2℃。 2） 恒温控制在 60℃。天平：剖析级，精准至±。 1 可编写可改正 马福炉：温度控制在 525±5℃。 干燥箱：温度控制在 105 和 130±3℃。 干燥器：用二氧化硅或同样的干燥剂。干燥剂两周一次在 130℃烘干留宿。 PH计：注意温控，用、缓和冲液标化。 移液管及套头：容量 100μl和 5ml 。 分派器或量筒： 1） 15±，供分派 78%的乙醇， 95%的乙醇以及丙酮。 2） 40±，供分派缓冲液。 . 磁力搅拌器和搅拌棒。 试剂 全过程使用去离子水，试剂不加说明均为剖析纯试剂 乙醇溶液： （1） 85%：加 895ml95%乙醇在 1L 量筒中，用水稀释至刻度。 （2） 78%：加 821ml95%乙醇在 1L 量筒中，用水稀释至刻度。丙酮： 供剖析用酶：在 0-5 ℃下储藏。 （1） 热稳固 α - 淀粉酶溶液： Cat. No. A3306， Sigma Chemical Co. ，St. Louis ， MO63178，或 Termamyl 300L，Cat. No. 361-6282 ，Novo-Nordisk ，Bagsvaerd ，Denmark， 或等效的酶。 （2） 蛋白酶： Cat. No. P3910， Sigma Chemical Co. ，或等效的。当日用 MES/TRIS 缓冲液中现配 50mg/ml 酶溶液。 （3） 淀粉葡糖苷酶溶液： Cat. No. AMG A9913，Sigma Chemical Co.，或等效的。 硅藻土：酸洗（ Celite 545 AW，， Sigma Chemical Co. ，或等效的） 。 清洗液：二者挑一。 1） 铬酸： 120g 重铬酸钠 Na2Cr2O7·2H2O， 1000ml 蒸馏水和 1600ml 浓硫酸。 （2） 实验室用液体洁净剂， 预备急需冲洗的 （ Micro ，International Products Corp. ， Trenton ， NJ08016，或等效的） 。用水配制 2%溶液。 2 可编写可改正 MES-TRIS缓冲液： L，温度在 24℃时 pH 值为。 （1） MES： 2- （ N-吗啉代）磺酸基乙烷（， Sigma Chemical Co. 或等效的）。 （2） TRIS：三羟（羟甲基）氨基甲烷（， Sigma Chemical Co. 或等效的）。 在的蒸馏水中溶解和，用 6mol/L NaOH调 pH 到，用水定容至 2L。（注意： 24℃时的 pH 为， 可是，假如缓冲液温度在 20℃， pH 就为，假如温度在 28℃， pH为。为了使温度在 20-28 ℃ 之间，需依据温度调整 pH 值。） 盐酸溶液： /L ，加 L 盐酸到 700ml 水中，用水定容至 1L。 操作方法 . 样品制备： （1） 固体样品：假如样品粒度＞，研磨后过（ 40-60 目）筛。 （2） 高脂肪样品：假如脂肪含量＞ 10%，用石油醚去脂。每克样品用