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烦恼有何惧怕，既然躲不掉，就调好心态与它共存。心向阳光，何惧风霜。 茫茫人海你我相遇就是缘分，欢迎下载！ 2021/4/26 * 核酸的提取及其组分的鉴定 * 2021/4/26 [目的] 1.熟悉苯酚法提取动物组织中核酸的原理和操作方法；2.了解核酸的组成，掌握核酸组分的鉴定方法。 [原理] 蒸馏水研磨：破坏肝细胞 水饱和苯酚：使蛋白质变性，与水分层，核酸位于水相 乙醇：沉淀核酸。 * 2021/4/26 [原理] 核酸可被硫酸水解得到磷酸、戊糖、含氮碱基化合物，根据这三种物质的性质特点可用不同的方法加以鉴定： 1．磷酸：可与钼酸试剂作用产生黄色的磷钼酸铵沉淀。 PO43-+12MoO32-+3NH4+ +24H+=（NH4）3 PO4?12MoO3?6H2O↓+6H2O 2．嘌呤：嘌呤碱可与硝酸银作用生成白色的絮状嘌呤银沉淀。 3．核糖：与浓硫酸共热得到糠醛，后者与3，5-二羟甲苯缩合而成绿色化合物。 * 2021/4/26 [步骤] 1．核酸的提取： ①取兔肝1克，剪碎置于研钵中，加2ml蒸馏水研匀，再加2ml蒸馏水混匀。 ②取15×100mm短试管1支，滴加匀浆液40滴（约2ml）。 ③向试管中加入90％苯酚溶液2ml，充分振摇5min（注意手法，防止溶液溅出），3000rpm离心5min。 ④用滴管小心吸取上层水相至另一试管中（贴壁吸取，为避免吸到下层液，可留一些上层液在原试管内）。 ⑤加入3 ml 95%乙醇，充分摇匀，直至絮状沉淀析出。 ⑥ 3000rpm离心5min，弃去液体，沉淀部分即为核酸。 * 2021/4/26 2．核酸的水解： 向核酸沉淀中加2ml蒸馏水，震荡摇匀使沉淀溶解。加入10％硫酸2ml，摇匀，于沸水浴中加热7分钟，冷却后备用。 3．核酸的鉴定： ①磷酸的鉴定： 测定管 对照管 核酸水解液 10 - 5%硫酸 - 10 钼酸试剂 10 10 摇匀,沸水浴5min 试剂（滴） 管别 * 2021/4/26 ②嘌呤的鉴定： 测定管 对照管 核酸水解液 20 - 5%硫酸 - 20 5％AgNO3 10 10 浓氨水 5 5 不可震摇！静置数分钟，观察结果。 试剂（滴） 管别 测定管 对照管 核酸水解液 5 - 5%硫酸 - 5 3，5-二羟甲苯 5 5 摇匀，沸水浴10min 试剂（滴） 管别 ③核糖的鉴定： * 2021/4/26 [注意] 苯酚、钼酸试剂及3，5-二羟甲苯等均有强烈的腐蚀性，操作时务必小心！若接触到苯酚，立即用95％酒精清洗。 实验中用到的第一支试管（含苯酚），不要清洗，请直接放在走廊的红色小桶内。 提取核酸时，应选用短粗试管（15×100mm）；鉴定时则可以选用长试管（15×150mm）。
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