梅毒的实验室诊断课PPT课件.ppt

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2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 非梅毒螺旋体血清试验-TRUST 7.试验完毕立即观察结果,否则影响结果准确性。 8.定性阳性者,确诊治疗前应作定量试验,一是可以了解患者抗体滴度,便于复查作比较,以判断疗效和预后观察;二可以避免“前带现象”。 9.初筛试验阳性,应做确证试验以排除生物学假阳性。 10.AIDS合并感染梅毒,梅毒血清可阴性,应作暗视野检查螺旋体,同时做HIV检查。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验-TPPA 一、TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验) [原理] TP-Ag(明胶颗粒)+Ab(血清) 洋红 色凝集(肉眼观察) 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验-TPPA [方法] 定性、定量试验 孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 … 血清稀释液 100 25 25 25 25 25 25 25 … 血清标本 25 25 25 25 25 25 25 25 25 标本稀释度 1:5 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 非致敏颗粒 25 致敏颗粒 25 25 25 25 25 最终滴度 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 轻轻振荡混匀,置湿盒内室温(15~30 ℃ )2小时后观察结果。 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验-TPPA [结果] 定性试验 2+~4+:颗粒凝集覆盖整个孔底,边缘粗糙 呈膜状。 1+:颗粒凝集呈多边性粗糙大环状。 +/-:颗粒浓集于孔底呈小环状 -:颗粒聚集于孔中央,边缘光滑呈小红点。 定量试验 出现阳性反应的最高稀释度作为最终滴度 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验-TPPA 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验-TPPA [临床意义] 1. 确证试验阳性可诊断梅毒感染,一种是现症感染者,另一种是治愈者。 2.由于特异性梅毒螺旋体抗体可终生阳性,因此不能用来作为疗效观察及治愈的判断标准。一般只作定性试验,根据临床需要才做定量试验。 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验-TPPA [注意事项] 1.反应板要清洁干净,遐免假阳性。 2.要用U形板不能用V形板,遐免假阴性。 3.试剂保存2~8℃ ,不能0℃以下冰冻。 4.反应温度以18~30 ℃为宜,用前试剂恢复至 室温。 5.试剂要在有效期内使用,不同批号不要混用。 6.血清要分纯,不能混有血液有形成分。 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验-TPPA 7.如未致敏颗粒出现凝集,应做吸收试验或 改用其它方法。 8.对于可疑阳性结果(1:80),建议作连 续观察或暗视野检查。 9. AIDS合并感染梅毒,血清学试验可阴 性,应作暗视野检查螺旋体。 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验-TPPA 方法学评价: 优点: 1、试剂稳定,批间差小 2、结果判读清晰明确 3、敏感性和特异性较TPHA进一步提高 不足:结果判定主观,较难实现自动化。 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM 梅毒螺旋体血清试验- FTA-ABS 二、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) TP-Ag+TP-Ab(灭活吸收后血清) 37 ℃ x30分钟 TP-Ag-Ab PBS洗涤 TP-Ag-Ab+IgG-FITC 37 ℃ x30分钟 TP-Ag-Ab-IgG-FITC PBS洗涤、封片、荧光镜检 莱果绿色荧光 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM FTA-ABS IgG抗体阳性(×400) 2011.8.31 WWW.ZHCCDC.COM FTA-ABS IgM抗体阳性(×400

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