子午流注纳甲法对急性缺血性脑卒中大鼠神经元特异性烯醇化酶S100B蛋白影响.docVIP

子午流注纳甲法对急性缺血性脑卒中大鼠神经元特异性烯醇化酶S100B蛋白影响 　　摘要：目的 观察子午流注纳甲法对急性缺血性脑卒中（AIS）模型大鼠血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、S100B蛋白含量的影响。方法 选用SPF级SD雄性大鼠，采用大脑中动脉线栓法建立模型，按随机数字表法分为空白组、假手术组、模型组、循经组和纳甲组，空白组、假手术组和模型组不作治疗，循经组予循经辨证取穴针刺治疗，纳甲组予子午流注纳甲法针刺治疗，每日定时治疗1次，观察神经功能及脑梗死体积情况，检测血清NSE、S100B蛋白的含量。结果 与模型组比较，循经组、纳甲组神经功能评分下降、梗死灶体积减小、梗死灶体积百分比降低（P0.05，P0.01），血清NSE、S100B蛋白含量降低（P0.05，P0.01），纳甲组效果总体优于循经组。结论 子午流注纳甲法通过降低AIS模型大鼠血清NSE、S100B蛋白含量达到神经保护和治疗作用。 　　关键词：子午流注纳甲法；急性缺血性脑卒中；S100B蛋白；神经元特异性烯醇化酶；大鼠 　　中图分类号：R245 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2015）06-0054-04 　　急性缺血性脑卒中（acute ischemic stroke， AIS）发病率、病死率、致残率较高。近年来，随着饮食结构及行为方式的变化，加之社会人口老龄化进程加剧，AIS发病率逐年升高，选择一种有效治疗方案及时救治，是改善预后、提高患者生活质量的关键。笔者应用子午流注纳甲法针刺治疗AIS患者，疗效较好[1]。脑缺血后神经胶质细胞的坏死和血脑屏障的破坏使神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S100B蛋白从脑组织溢出到血管腔隙[2]，其血清中水平变化能够反映脑损伤程度及疾病预后。因此，本研究观察子午流注纳甲法对AIS模型大鼠血清中NSE、S100B蛋白的影响，为临床提供实验依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物及分组 　　健康成年SD雄性大鼠60只，3月龄，SPF级，体质量（200±20）g，甘肃中医学院实验动物中心提供，许可证号SCXK（甘）2011-0001。饲养于甘肃中医学院实验中心SPF级实验室，适应性喂养1周，术前8 h禁食。所有动物按体质量编号，按随机数字表法分组，抽取12只为空白组，12只为假手术组，其余进行造模。符合纳入标准的造模成功大鼠再分成模型组、循经组、纳甲组，每组12只。 　　1.2 针具与仪器 　　华佗牌25 mm×0.32 mm美容针灸针，苏州针灸器械厂。BP-1215型Sartorius分析天平，北京多利斯天平有限公司；TLS-2000A型电子秤，常熟双杰测试仪器厂；TCG-16B型台式低速离心机，上海医疗器械（集团）有限公司手术器械厂；DW-86L828型超低温冰箱，中国海尔公司；CMIAS-108型多媒体病理图像分析仪，北京航空航天大学研制。氯化2，3，5-三苯基四氮唑（TTC），化学纯，北京福星化工厂；NSE、S100B蛋白试剂盒，上海源叶生物科技有限公司。 　　1.3 造模 　　参考文献[3]方法，大脑中动脉线栓法制备大鼠AIS模型。10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，仰卧位固定于鼠板上，剪除颈部毛发并消毒，在颈部正中纵行切长约2 cm的开口，钝性分离皮下筋膜、肌肉，充分暴露右侧颈总动脉（CCA）及分支颈内动脉（ICA）、颈外动脉（ECA），游离右侧CCA，分别在CCA近心端、ECA及CCA远心端挂线备用，用微动脉夹暂时夹闭ICA，然后近心端结扎CCA、ECA。在CCA上距分叉部4 mm处剪一小口，将备用栓线插入至ICA，扎紧CCA远心端的线以固定栓线，松开动脉夹，直至遇到少许阻力为止，从CCA分叉部起插入深度约为18～19 mm，术毕检查无活动性出血后，将线头置于体内，缝合皮肤。整个手术过程中环境温度（25.0±1.0）℃，保证大鼠生命体征稳定。术后单笼饲养，自由进食、饮水。假手术组处理方法同上，但不插线栓，仅分离右侧CCA、ICA及ECA。大鼠麻醉清醒后，进行神经系统评分，1～3分为造模成功，用于实验，0分及昏迷不醒者剔除并补充。 　　1.4 治疗 　　大鼠清醒后当日开始治疗，每日同一时间治疗1次，直至处死动物为止。空白组、假手术组和模型组每日只进行相同抓取，同期同步饲养，不作任何治疗。参照文献[4-5]穴位定位或类比取穴。循经组循经辨证选取“百会”向后斜刺、“合谷”直刺、“三阴交”直刺。纳甲组在循经辨证取穴基础上根据文献记载徐氏子午流注纳甲法[6]，依日按时开穴针刺治疗，所开穴位为主穴先刺，循经辨证取穴为配穴后刺。每次留针20 min，针刺深度依穴位而定，均采用平补平泻法。 　　1.5 观察指标及方法 　　1.5.1 一般情况及神经功能 每日观察所有大鼠的精神状态