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第四章 基因工程药物设计与研制方法2012PPT
第四章 基因工程药物设计与研制方法;组织;二、复制重组蛋白药品存在的问题;(三)产生抗体的后果;(四)预测蛋白药物的免疫原性的方法;定向进化技术的三个步骤;(一)易错PCR;易错PCR成功的关键;(二)DNA或基因改组(DNA shuffling);DNA Shuffling的基本步骤;实例:随机挑取枯草杆菌蛋白酶DNA
重组装库中10个克隆序列。;DNA Shuffling的引物如何设计?;相关基因组(parental sequences)相似程度;
酶切产生的DNA片段大小及内切酶种类;
退火温度及PCR反应条件;
突变频率控制在适度范围内。;1、随机引物引发体外重组;(三)大肠杆菌突变株用于定向突变;盒式诱变基本步骤;二、定点突变;(一)寡核苷酸引物诱变;寡核苷酸引物诱变过程;提高寡核苷酸引物诱变突变效率的方法;已知有些限制酶不能切割硫代磷酸DNA分子。;第三节 创新药物设计;M13噬茵体载体;单链DNA,由6407碱基组成。
90%以上序列可编码蛋白质,共有11个编码基因。
基因之间的间隔区多为几个碱基。较大的间隔位于基因Ⅷ和基因Ⅲ以及基因Ⅱ和基因Ⅳ之间,其间有调节基因表达和DNA合成的元件。;复制蛋白(基因Ⅱ,Ⅴ和Ⅹ)。;(3)M13噬菌体的复制;(4)M13噬菌体载体的构建
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