il27对dss小鼠结肠炎模型nlrp3炎性小 体的影响-effects of il27 on inflammatory small bodies of dss mouse colitis model nlrp 3.docx

学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：日期：年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑 州大学。必威体育官网网址论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：日期：年月日IL-27 对 DSS 小鼠结肠炎模型 NLRP3 炎性小体的影响研究生 周力为 导师 冯百岁郑州大学第五附属医院消化内科 河南郑州450000摘要研究背景炎 症 性 肠 病 (Inflammatory Bowel Disease, IBD) ， 包 括 溃 疡 性 结 肠 炎 (Ulcerative colitis, UC)和克罗恩病(Crohn’s disease, CD)，是一组以反复发生与缓 解为特点的慢性肠道炎症。近年来 IBD 发病率有所升高，但其具体发病机制尚 不清楚，目前认为可能与遗传、环境、免疫等多因素密切相关。固有免疫是免 疫系统识别自我非我的第一道防线，免疫细胞通过模式识别受体(PRRs)识别危险 信号，如病原微生物等。NLRP3 是胞内模式识别受体之一，在中性粒细胞、树 突状细胞、淋巴细胞、上皮细胞等均有表达，能够和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、 Caspase-1 组成高分子量的蛋白复合体，称为 NLRP3 炎性小体。多种危险信号如 微生物及其代谢产物，及内外源性刺激物如尿酸、ATP、二氧化硅等均可激活 NLRP3 炎性小体，引起 Caspase-1 自剪切成为活化形式，从而控制着下游 IL-1β 和 IL-18 的成熟和分泌，参与固有免疫应答，他们强大的促炎作用直接影响宿主 对感染和损伤的应答。IL-27 是是近年来研究较热的一种细胞因子，是 IL-12 家 族的新成员，其具有异二聚体结构，由 EB 病毒诱导基因 3(EBi3)和 IL-27 p28 构 成。IL-27 主要来源于活化的抗原呈递细胞（Antibody presenting cells, APCs）， 由树突状细胞、单核细胞和巨噬细胞等在微生物或其他免疫刺激物刺激下产生。 IL-27 可以抑制 Th2 及 Th17 应答，促进 Treg 及诱导抗炎因子 IL-10 的产生，具 有强大的免疫抑制作用。目的I通过不同剂量的 IL-27 对 IBD 模型小鼠进行干预，观察 IBD 动物模型的结肠组织学变化，检测小鼠肠组织 NLRP3 炎性小体相关指标及小鼠血清 IL-1β、 IL-18 的表达水平，探讨 IL-27 对 IBD 模型中 NLRP3 炎性小体的影响。方法将 48 只雄性 C57BL/6 小鼠随机分为 4 组，每组 12 只。①对照组：自由饮 水进食，无特殊干预。②DSS 模型组：连续 10 天每天自由饮用以蒸馏水配制的 3% DSS 溶液，每两天更换新的 DSS 溶液，自由取食。③低剂量 IL-27 组：在自 由饮用 DSS 的基础上，将 500ng IL-27 溶于去离子水 300μL，每日每只小鼠腹腔 注射 IL-27 溶液 300μL。④高剂量 IL-27 组：在自由饮用 DSS 的基础上，将 1μg 的 IL-27 溶于去离子水 300μL，每日每只小鼠腹腔注射 300μL。第 12 天处死小 鼠，取血清 ELISA 检测 IL-1β、IL-18 浓度，取结肠组织 HE 染色、PCR 及 Western Blot 检测。实验数据用 SPSS 13.0 统计软件处理，计量数据采用均数±标准差（ x ±s） 表示，所有数据用 Levene 检验方法进行方差齐性检验，各组数据采用单因素方 差分析(ANOVA)，对方差分析有意义者再采用 LSD-t 检验法进行两两比较，检 验水准为 α=0.05，P0.05 时被认为具有统计学意义。采用 Pearson 积矩相关系数 来描述变量之间的关系。结果1．疾病活动指数（DAI）评分与对照组相比，DSS 模型组小鼠出现腹泻、便血及体重下降，DAI 评分升 高，高剂量 IL-27 组症状较模型组轻。四组的 DAI 评分有差异（F=54.6 , P0.05）， 模 型 组 高 于 对 照