cuedc2调控巨噬细胞功能的机制分析word格式论文.docxVIP

目录缩略词表1摘要3Abstract5引言7材料与方法111.材料及来源111.1.细胞培养111.2.动物培养112.主要试剂123.实验方法133.1.人原代单核细胞分离、纯化以及体外培养133.2.小鼠巨噬细胞分离以及体外培养143.3.原代巨噬细胞siRNA和microRNA转染153.4.腺病毒介导的外源基因在原代巨噬细胞中表达153.5.炎性因子实时荧光定量PCR检测153.6.microRNA丰度检测173.7.血清炎性因子检测- ELSIA183.8.小鼠炎性肠病模型建立以及评价18实验结果191.单核-巨噬细胞分化过程中CUEDC2 表达水平显著上调191.1人原代巨噬细胞分化过程中CUEDC2表达显著上调191.2小鼠原代巨噬细胞分化过程中CUEDC2 表达显著上调202.单核-巨噬细胞分化过程中CUEDC2 的表达受microRNA调控212.1CUEDC2在单核细胞分化过程中的上调是转录后调控212.2生物信息学预测得到调控CUEDC2的microRNA-324-5p.222.3miR-324-5p在单核-巨噬细胞分化过程中表达水平下调242.4miR-324-5p抑制细胞中CUEDC2 的表达量253.CUEDC2 缺失的巨噬细胞对炎性刺激反应过度263.1CUEDC2敲除小鼠巨噬细胞对炎性刺激反应过度263.2人巨噬细胞中敲低CUEDC2 使其对炎性刺激更加敏感274.过表达CUEDC2抑制巨噬细胞的炎性激活294.1人原代巨噬细胞中过表达CUEDC2抑制巨噬细胞炎性激活294.2鼠原代巨噬细胞中过表达CUEDC2抑制巨噬细胞炎性激活305.CUEDC2 敲除小鼠对LPS 刺激的响应315.1血清炎性因子分泌水平变化325.2腹腔巨噬细胞炎性因子表达水平变化325.3脾脏炎性因子水平变化33讨论41结论44附表45参考文献47综述54发表文章一70发表文章二77个人简历83致谢84缩略词表英文缩写英文全称中文译名MoMonocyte单核细胞M?Macrophage巨噬细胞PBMCPeripheralbloodmononuclearcell外周血单个核细胞GM-CSFGranulocyteMacrophageColonyStimulatingFactor粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子M-CSFMacrophageColonyStimulatingFactor巨噬细胞集落刺激因子LPSLipopolysaccharides脂多糖IFN?Interferongrammar干扰素IL-10Interleukin10白介素10BMDMBonemarrowderivedmacrophage骨髓分化的巨噬细胞PECpleuralandperitonealmacrophages腹膜巨噬细胞IBDInflammatoryboweldisease炎性肠病Realtime-PCRReal-timequantitativePolymeraseChainReaction实时定量PCRELISAEnzyme-linkedimmunosorbentassay免疫酶连分析DSSDextransulfatesodium葡聚糖硫酸钠SiRNASmallinterferenceRNA小干涉RNAMiRNAmicroRNA微小RNAMiRNA-mimicMicroRNA-mimic微小RNA 模拟物CUEDC2CUEdomain-containing2包含CUE结构域的蛋白MG-132MG-132蛋白质酶体抑制剂PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液SDSsodiumdodecylsulphate十二烷基硫酸钠PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳法IL-1?Interleukin1beta白介素1beta英文缩写英文全称中文译名IL-6Interleukin6白介素6iNOSinducibleNOsynthase诱导的一氧化氮合成酶TNF?TumorNecrosisFactor肿瘤坏死因子NF-?BNuclearFactor-κB核因子κBNIKNuclearFactorB-InducingKinase核因子κB诱导激酶GAPDHGlyceraldehyde3-phosphatedehydrogenase三磷酸甘油醛脱氢酶TubTubulin微管蛋白质IL-12p40Interleukin12P40白介素12AIL-23p19Interleukin23P19白介素23ATrisTris(hydroxymethyl)aminomethane三羟基氨基甲烷NP-40NonidetP-40一种非离子型去污剂HEPESN-2-hydroxyethylpiperazine