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crt促进dc疫苗抗肿瘤特异性免疫应答分析word格式论文
AbstractObjective:Calreticulin(Calreticulin,CRT)is ahighlyconservedCa2+binding proteininmammals,whosemolecularsizeis46kDa.Aftertreatedwith anthracycline-basedchemicaldrugs,tumorcellsenteredintotheapoptosisprocess, followedwiththeCRTecto,inducingtheclearanceofapoptotictumorcellbyphagocytes initiatively.Thepurposeoftheresearchistoexplorethepotentialmechanismofwhich CRTenhancetheantigenpresentingabilityofpulsedDC,andinduceanti-tumorspecific immuneresponse.ItwillprovideanewpatternfortheresearchofDCvaccineinthe future.Methods:(1)CloneCRTandMUC1byPCR,andconstructoverexpressionplasmid ofpHBAd-U6-CMV-MUC1/CRTandpHBAd-U6-CMV-MUC1.(2)Packagerecombinant plasmidofpHBAd-U6-CMV-MUC1/CRTandpHBAd-U6-CMV-MUC1,thencollect adenovirusandamplify.(3)Isolateprimarymousedendriticcells(DC)andthendetectthe specificmolecular.(4)IsolatemouseTlymphocytes.(5)StimulateTlymphocyteswith primaryDC infected byCRT-MUC1.Results:(1)ConstructedpHBAd-U6-CMV-MUC1/CRTand pHBAd-U6-CMV-MUC1successfully.(2)Packaged,amplifiedadenovirus pHBAd-U6-CMV-MUC1/CRTandpHBAd-U6-CMV-MUC1successfully.(3)Isolate primarymousedendriticcells(DC)successfully.(4)StimulateprimaryTlymphocytes with adenovirus-infectedDC effectively.Conclusion:TheintracellulardeliveryofMUC1-CRTbyadenovirussensitizeDC successfully,whichprovedbyinvitrocellexperiment,andimprovedtheantigen presentingabilityofDC,inducedspecificanti-tumorimmuneresponse,whichprovides new ideas ofanti-tumorDC vaccine development.Key words:CalreticulinDendritic cellsTumorimmunotherapy目录英文缩略词表.............................................................错误!未定义书签。引言.............................................................................错误!未定义书签。材料与方法.................................................................................................5结果...........................................................................................................20第一部分目的基因克隆构建和腺病毒的包装第二部分小鼠原代树突状细胞的提取和鉴定第三部分小鼠T淋巴细胞的提取和DC细胞对T淋巴细胞的致敏讨论28小结................................................
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