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C6胶质瘤荷瘤大鼠伽玛刀治疗后肿瘤组织Ang-2、VEGF表达变化的实验研究摘要目的：通过建立 C6 胶质瘤荷瘤大鼠伽玛刀治疗后模型，检测分析肿瘤组织中 Ang-2、VEGF 基因和蛋白表达水平在治疗组和对照组的表达差异，探讨伽玛刀对胶质瘤放疗作用中血管效应的效应机制。方法：（1）通过体外培养与传代方法培育C6胶质瘤细胞，收获对数生长期细胞并制备成细胞悬液，用微量注射器大鼠颅内缓慢注射细胞悬液5微升，后用骨蜡封闭，常规饲养，2周后行MRI检查，发现肿瘤则确认建模成功，后随机分成治疗组和对照组，治疗组行伽玛刀治疗。（2）于伽玛刀治疗后7d，将大鼠处死取材，分别用免疫组化、RT-PCR、western-blotting方法检测两组瘤组织中Ang-2、VEGF基因和蛋白的表达水平，并行数据统计分析。结果：（1）结果表明采用颅内注射高浓度C6胶质瘤细胞悬液后常规饲养的方法，荷瘤大鼠建模成功率达95%。（2）放疗后7d取材，免疫组化结果治疗组瘤组织Ang-2 阳性率为32.83%，较对照组70.01%明显降低，其差异有统计学意义(P0.01)；治疗组瘤组织VEGF阳性率为40.17%，较对照组78.23%明显降低，其差异有统计学意义(P0.01)。（3）RT-PCR结果显示治疗组瘤组织中Ang-2 mRNA和VEGF mRNA表达水平均低于对照组瘤组织中同一基因的表达，其差异有统计学意义（P0.05）。（4）Western blotting分析放疗后7d两组Ang-2蛋白表达情况，相对于对照组，治疗组伽玛刀放疗后Ang-2蛋白表达抑制率为50.00%，两组差异有统计学意义（P0.05）； Westernblotting分析放疗后7d两组VEGF蛋白表达情况，相对于对照组，治疗组伽玛刀放疗后VEGF蛋白表达抑制率为47.09%，两组差异有统计学意义（P0.05）。结论：（1）本实验建立了一种稳定、可重复性高的C6胶质瘤荷瘤大鼠伽玛刀治疗后模型，为胶质瘤伽玛刀治疗的进一步基础研究提供条件（2）抑制胶质瘤组织中 Ang-2、VEGF 基因和蛋白的表达，可能是伽玛刀治疗胶质瘤抑制肿瘤血管生成的效应机制之一。关键词：伽玛刀胶质瘤 C6 Ang-2 VEGF 作用机制ExperimentalStudyonChangesinTumorAng-2,VEGFExpressionsafterGammaKnifeTreatmentonC6Glioma-BearingRatsAbstractObjective:BybuildingC6glioma-bearingrats’aftergammaknifetreatmentmodel,respectivelydetectAng-2,VEGFgenesintumortissuesaswellasdifferencesinproteinexpressionlevelsbetweentreatmentgroupandcontrolgroup,exploretheactionmechanismofgammaknifeonvasculardamageeffectingliomaradiotherapeuticaction.Methods:(1)cultivateC6gliomacellsthroughinvitrocultureandpassage,gathercellsinlogarithmicphaseand preparecellsuspension,usemicroinjectortoslowlyinject5μLcellsuspensionintorats’intracraniums,thensealthemwithbonewax,feedregularly,2 weekslater,conductMRItest,iftumorisfound,themodelbuildingissuccessful.Randomlydividetheratsintotreatmentgroupandcontrolgroup,conductgammaknifetreatmenttothetreatmentgroup.(2)7daysaftergammaknifetreatment,sacrificetherats,detectAng-2,VEGFgenesandproteinexpressionlevelsintumortissueusing immunohistochemicalmethod,RT-PCR,western-blottingmethodrespectively,andconductstatisticalanalysis.Results:(1)Theresultsshowedthatthemethodofregular