菊花的组织培养 张冰雪.pptVIP

1902年，一位德国植物学家大胆预言:“植物的体细胞在一定的条件下，可以同受精卵一样，具有潜在的发育成植株的能力” 1958年，美国科学家将胡萝卜韧皮部的一些细胞进行培养，获得完整植株。 证明了高度分化的植物细胞仍然具有发育成完整植株的能力 概念：是指使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育成一完整植株的一种无菌技术，也称之为离体培养。 什么是植物的组织培养？ B. 植物细胞全能性原因： 生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必须的全部基因。 植物组织培养原理： 植物细胞的全能性 A.概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 在个体发育过程中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构、生理功能上出现稳定差异的过程。 细胞分化： （1） 受精卵 生殖细胞 体细胞； （2）植物细胞 动物细胞 C.大小： 一般来说细胞分化程度越高，细胞全能性越低。 D.:全能性表现的条件 离体条件 营养物质 植物激素 适宜的外界条件 菊花的组织培养 什么叫分化？其实质是什么? 什么叫脱（去）分化、再分化？ 愈伤组织的细胞有什么特点？ 如何控制细胞的脱分化与去分化？ · 阅读32页解决下列问题： 二、植物组织培养的基本过程 基因的选择性表达 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 出根出芽 植物体 植物组织培养的基本过程 移栽 如何控制细胞的脱分化和再分化？ 四.植物组织培养的 外植体 愈伤组织 出根出芽 完整植株 脱分化 再分化 过程 有细胞分裂，无细胞分化 有细胞分裂和细胞分化 三、影响植物组织培养的因素： 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 3、两者植物激素使用顺序影响结果 使用顺序 实验结果 先生长素， 后细胞分裂素 有利于细胞分裂但不分化 先细胞分裂素， 后生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 4、两者植物激素用量比例影响结果 生长素/细胞分裂素比值 结果 比值高时 促根分化， 抑芽形成 比值低时 促芽分化， 抑根形成 比值适中 促进愈伤组织生长 三、影响植物组织培养的因素： 1、外植体的选取 2、培养基的配制(MS培养基) 3、两者植物激素使用顺序影响结果 5、温度、PH、光照等条件 4、两者植物激素用量比例影响结果 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 配制各种母液 配制培养基 灭菌 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 结合录像外植体灭菌与接种操作，谈谈组织培养污染的主要途径及怎样预防污染？ 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 结果分析与评价 课题延伸 5.植物组织培养应用 ⑴快速繁殖： 运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株，而且均来自一单一的个体，遗传性状一致。例如一株葡萄一年繁殖到3万多株，一株兰花一年繁殖到400万株。 　　⑵种苗脱毒：由于病毒的感染严重影响作物的产量和品质，而利用组织培养技术可以有效地除去植物体内的病毒，得到大量的无病毒种苗。主要的方法是培养植物茎尖分生组织，也可以采用热处理或加入化学试剂的方法达到脱毒的效果。已经取得成功的有马铃薯、草莓、香蕉、葡萄等等。 课题延伸（略） 练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行