[经管营销]第5章 紫外吸收光谱分析法5上课用.pptVIP

生物工程学院 第五章 紫外-可见吸收光谱分析法 第一节 概 述 generalization 第二节 光的吸收 第三节 光吸收的基本定律 Lambert-Beer’s Law 第四节 紫外可见光分光光 度计UV-VIS spectrometer 第五节 定性与定量分析 Qualitative- Quantitative Analysis 第五章 紫外-可见吸收光谱分析法 一、定义 基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法，包括比色法、可见分光光度法及紫外分光光度法等。本章重点讨论可见光区的吸光光度法及紫外光区的紫外分光光度法。 日常分析工作中----KMn04水溶液呈深紫色，K2CrO4溶液呈黄色，CuSO4溶液呈蓝色……当这些有色物质溶液的浓度改变时，溶液颜色的深浅也随之改变，溶液越浓，颜色越深----可以通过比较溶液颜色的深浅来测定物质的含量。 这种基于比较溶液颜色的深浅进行定量分析的方法，称为目视比色法。采用分光光度计对物质吸光度进行测定，从而求出物质含量的方法，称之为分光光度法。 紫外-可见吸收光谱分析法是利用物质的分子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析的方法。 按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法(200-400nm)和可见分光光度法(400-760nm)，合称为紫外—可见分光光度法(200-760nm)。 分光光度法是在比色法( colorimetry)的基础上发展起来的。 二、分光光度法与比色法区别 比色法只限于在可见光区，分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。 比色法用的单色光是来自滤光片，谱带宽度从40－120nm，精度不高，分光光度法则要求近于真正单色光，其光谱带宽最大不超过3－5nm，在紫外区可到1nm以下，来自棱镜或光栅，具有较高的精度。 三、紫外—可见分光光度法特点 (1) 仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度较快。 (2)灵敏度较高。 (3)有较好的选择性。通过适当地选择测量条件，一般可在多种组分共存的体系中，对某一种物质进行测定。 (4)精密度和准确度较高。在仪器设备和其他测量条件较好的情况下，其相对误差可减小到1％一2％。 (5)用途广泛。医药、化工、冶金、环境保护、地质等诸多领域---已成为必不可少的测试手段之一。 无机和有机物质--定性和定量测定,结构分析。 第五章 紫外-可见吸收光谱分析法 一、光的基本性质 光是一种电磁波，具有波动性和微粒性。 波动性 ??＝C 微粒性 波长(或频率)一定，光子的能量一定。波长越短，光子的能量越大。 自然界中存在各种不同波长的电磁波，电磁辐射(电磁波)按其波长可分为不同区域： ?一射线 5*10-3?0.14nm X一射线 10-3?10nm 远紫外 10?200nm 近紫外 200?400nm 可见光 400?760nm 近红外 0.75?2.5?m 中红外 2.5?50?m 远红外 50?1000?m 微波 0.1?100cm 无线电波 1?1000m 分光光度法所使用的光谱范围在200nm-10μ（1μ= 1, 000nm ）之间。其中200nm－400nm为紫外光区，400nm－760nm为可见光区，760nm－10,000nm为红外光区。 理论上将具有同一波长的光称为单色光，由不同波长的光组成的光称为复合光。 人眼能感觉到的光称为可见光，它的波长范围约为400—760nm。白光(日光、白炽灯光、日光灯光等)是由各种不同色光按一定强度比例混合而成的。 一束白光通过三棱镜可分为红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等七种色光，这七种色光可以混合为白光。实验证明，如果把适当的两种色光按一定强度比例混合，也可以成为白光，这两种色光称为互补色光。 日光等白光是一对对互补色光按适当的强度比例混合而成的。 二、物质的颜色和对光的选择性吸收 物质呈现的颜色与光有着密切的关系-----与光的组成和物质本身的结构有关。 当光束照射到物质上时，物质对于不同波长的光的吸收、透射、反射、折射的程度不同，而使物质呈现不同的颜色。