微生物室作业指导书.docVIP

微生物室作业指导书 微生物室岗位 一、岗位设备以及工艺流程 1．设备流程 2．岗位设备一览表 序号 设备编号 设备名称 规格型号 数量（台） 1 JZ-1 卧式圆形压力蒸汽消毒器 YXQ-WY-21-600 1 2 JZ-2 标准型双人净化工作台 SW-CJ-1C 2 3 JZ-3 不锈钢接种瓶 10L 2 4 JZ-4 新飞冰箱 BCD-165E 1 5 JZ-5 容声冰箱 BCD-203A 1 6 JZ-6 澳柯玛冷藏展示柜 SC-230 1 7 JZ-7 电热手提式压力蒸汽灭菌锅 YXQ。SG41。280 1 8 JZ-8 生物显微镜 XS-18 1 9 JZ-9 落地扇 FS18-40 1 10 JZ-10 电动搅拌机 D60-2F 2 11 JZ-11 增力电动搅拌器 JJ-1 1 12 JZ-12 超级恒温水浴 CS501 1 13 JZ-13 超级恒温器 HH．S 1 14 JZ-14 恒温磁力搅拌器 78HW-1 3 15 JZ-15 电热蒸馏水器 HS。Z11。5 1 16 JZ-16 电热恒温培养箱 SKP-01 1 17 JZ-17 电热鼓风干燥箱 DGF30/T-I 1 18 JZ-18 精密PH计 PHS-3B 1 19 JZ-19 阿贝折射仪 WYA 1 20 JZ-20 弧形往复式生物液体培养震荡台 HSZ-1 1 21 JZ-21 回转式恒温调速摇床 DKY-Ⅱ 1 22 JZ-22 不锈钢培养架 1.5m×1.1m 2 23 JZ-23 中效送风机（带电加热） 800M3/h 1 24 JZ-24 除湿器 DH-350B 1 3．工艺控制流程 4．工艺控制要点 控制项目 工艺参数 超出控制范围影响 调整措施 茄形瓶菌种斜面培养温度 30℃ 影响 严格控制控温器 茄形瓶菌种斜面保藏温度 低温保藏 影响 严格观查冰箱 蒸汽消毒器消毒压力及时间 121℃×45min 影响 严格按照压力容器操作规程操作，控制好压力及温度。 4.1制备孢子悬浮液：必须在无菌操作台上制备。 4.2孢子悬浮液转入不锈钢接种瓶：必须在无菌情况下操作。 4.3接种子罐、发酵罐培养：温度30℃；压力0.1Mpa；超出控制范围影响； 4.4检测菌丝体酶活：温度50±1℃；超出控制范围影响； 二、操作控制程序 1．菌种斜面操作控制程序 1.1操作步骤 1.1.1分离 1.1.1.1、将培养皿用玻璃铅笔标记，标明-4、-5、-6各3只，另外6个试管插入试管架，分别标明-l、-2、-3、-4、-5、-6。将无菌生理盐水往6个试管中各加入4.5ml。 1.1.1.2、开始稀释。用吸管吸取已摇匀的孢悬液O.5mL注入-l试管，摇匀。即从O.5mL加至5mL，稀释10倍，这一试管的菌液浓度为原菌液浓度的1/10，即lO-1，简称-1。另取一吸管从-l试管吸0.5mL至-2试管，摇匀。再取一吸管从-2试管吸取O.5mL至-3试管……依次进行。要求一支试管只吸取一个稀释菌液，随即换掉，并在吸取菌液入下一号试管前，用吸管吸取和吹出此已摇匀后的菌液3—5次，以帮助菌液均化。 2.1.1.3、从-4号试管开始，在吸取0.5mL至下一试管后，同一试管吸取菌液个0.2mL至3个同一稀释标号的培养皿中，直至-6试管为止。采用什么样方式和匀菌液于培养基内，可根据要求进行。然后将9个培养皿放在30℃的保温培养箱中培养，培养好后收入冰箱待用。 1.2、接种 1.2.1操作步骤(以液体试管移接液体试管说明) 1.2.1.1、左手手拿两只液体试管，外侧为菌液试管。 1.2.1.2、将接种环在火焰上烧红灭菌。 12.1.3、右手取下管塞，接种环凉后使用。 1.2.1.4、试管口靠近火焰灭菌。 1.2.1.5、将一环菌液移至培养液管中。 1.2.1.6、将接种环在培养液中摇晃一下，取出。 1.2.1.7、先将试管在火焰上消毒后，塞管塞。 1.2.1.8、将接种环火焰灭菌放回原处。 1.2.1.9、在试管标签上标上日期等送培养箱培养。 1.3.培养 1．3．1、培养室必须清洁。 1．3．2、培养物不应摆放过于稠密，需有一定的间隙。 1．3．3、控制好培养温度以及观察培养中的生长情况。 1．3．4、培养好的菌种要收藏好。 1．4、保藏 菌种保藏主要是低温保藏，方法根据《工业微生物实验手册》上的相关方法进行。 2．卧式圆形压力蒸汽消毒器操作控制程序 2．1操作控制程序 2．1．1加水：使用此消毒器前须开启进水阀，使水进入蒸汽发生器内，加至离水位表顶端5—10毫米处为止，NN关NANN。每次消毒前应检查贮水