3种椰子基因组DNA提取方法的比较.pdfVIP

中国虐亏c墨握 2013，29(27)：154-t58 ChineseAgriculturalScienceBulletin 3种椰子基因组DNA提取方法的比较 罗 意-，，范海阔 ，黄绵佳 ，肖 勇 (中国热带农业科学院椰子研究所，海南文昌571339；海南大学园艺园林学院，海 口570228； 海南省热带油料作物重点实验室，海南文昌571339) 摘 要：旨在得到一套快速提取椰子DNA的方法。采用CTAB小样法、SDS．CTAB法以及PVP法提取椰 子组织的DNA，并通过后续的PCR扩增和酶切等实验 比较 了3种方法所提取的DNA质量的优劣。将 CTAB小样法提取 的DNA与SDS—CTAB法和PVP法提取 的DNA进行 了比较 ，CTAB小样法提取 的 DNA的O o／0／92。。(1，839)较另外2种方法SDS—CTAB法f1．709)和PVP法(1．613)的值更高，CTAB小样法 提取的DNA适合于PCR扩增，扩增的条带清晰，且特异性好。此外，CTAB小样法提取的DNA，酶切也 较为均匀。CTAB小样法能高效地提取椰子的DNA，并且能一次提取大量的高质量DNA样品，因而能 满足高通量的实验要求，同提取DNA能较好地满足下游的分子生物学研究。 关键词：椰子；DNA提取；CTAB法；SDS法；PVP法 中图分类号：Q[37] 文献标志码 ：A 论文编号：2012．3500 TheComparisonofThreeMethodsforExtractingGenomicDNAofCoconut LuoYi，FanHaikuo ，HuangMianjia2，XiaoYong。 alAgriculturalSciencesWenchangHainan571339； fCoconutResearchInstitute，ChineseAcademyo ， ． fTropic CollegeofHorticultureandLandscape， HainanUniversity， Haikou570228； 3HainanKeyLaboratoryofTropicalOilCropsBiology,WenchangHainan571339) Abstract：ThestudywascarriedoutfordevelopingarapidmethodforDNA ofextractingcoconut．Thequality ofDNA extractedwithmini—CTAB．SDS—CTABandPVPmethodwascompared．Inthisstudy．thecomparison ofthreesetsofcoconutDNA．whichwereisolatedseparatelybymini—CTABandSDS—CTABmethodorPVP method，showedthatDNA isolatedbymini—CTABhadhigher D 80(1．839)thanthatofSDS—CTAB f1．7091orPVPmethodf1．613)．MeanwhileDNAisolatedwiththethreemethodswasusedofrthedownstream PCRamplificationandrestrictionanalysis．TheDNAtemplatefrommini—CTABmethodproducedmoreclearer andspecificbands．Thedouble—enzymecleavageofDNArfom mini—CTABmethodshowedmoreevenbands． Them